基于RNA-Seq的3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化過(guò)程中差異表達(dá)基因研究
發(fā)布時(shí)間:2021-01-28 20:29
脂肪細(xì)胞不僅是脂肪組織的主要構(gòu)成組分,而且在整個(gè)生命體的新陳代謝穩(wěn)態(tài)調(diào)控過(guò)程中發(fā)揮重要作用。脂肪生成是指由成纖維細(xì)胞狀的前脂肪細(xì)胞發(fā)育成為成熟脂肪細(xì)胞的過(guò)程,并且脂肪生成是一個(gè)需要大量轉(zhuǎn)錄因子按次序活化的多級(jí)精準(zhǔn)調(diào)控過(guò)程,如過(guò)氧化物增殖體激活受體γ(peroxisome proliferator activated receptor-γ,PPAR-γ)和CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein,C/EBP)基因家族。為了研究調(diào)控脂肪生成的轉(zhuǎn)錄組事件,對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞(D0)和其分化的成熟脂肪細(xì)胞(D13)進(jìn)行了RNA-Seq測(cè)序。與前脂肪細(xì)胞(D0)相比,成熟脂肪細(xì)胞(D13)共有4443個(gè)倍性變化≥2.0的差異表達(dá)基因。通過(guò)對(duì)RNA-Seq數(shù)據(jù)分析,發(fā)現(xiàn)在3T3-L1前脂肪細(xì)胞脂肪分化過(guò)程中甲基固醇單加氧酶1(Methylsterol monooxygenase1,MSMO1)的表達(dá)是顯著下調(diào)的。這表明MSMO1可能是脂肪細(xì)胞分化過(guò)程中一個(gè)新的調(diào)控因子,但它在脂肪生成中的作用尚未報(bào)道,因此重點(diǎn)對(duì)該基因在脂肪生成中的功能進(jìn)行研究。...
【文章來(lái)源】:聊城大學(xué)山東省
【文章頁(yè)數(shù)】:48 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
脂肪細(xì)胞分化過(guò)程及關(guān)鍵調(diào)控因子的功能相互關(guān)系
2-1. 3T3-L1 前脂肪細(xì)胞在體外分化成為成熟脂肪細(xì)胞。色;(B)前脂肪細(xì)胞(D0)和脂肪細(xì)胞(D13)脂肪標(biāo)志基(**P<0.01. β-actin 作為內(nèi)參)檢測(cè)本進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析,由表2-2可見(jiàn),經(jīng)過(guò)質(zhì)量(D0-1、D0-2、D13-1和D13-2)RNA完整性指數(shù)RIN ≥ 9.0;OD 260/OD 280 ≥ 2.0;28 S/18 S的污染,同時(shí)也沒(méi)有降解,可以用于下一步的RN表 2-2. 樣本RNA質(zhì)量OD 260/OD 280 RIN 22.02 9.1 2.04 9.2 2.03 9.1
肪細(xì)胞(D0)和脂肪細(xì)胞(D13)中分別獲得了約120.5 million和122.8 million的cleeads;在四個(gè)樣品中,uniquely mapped reads 的范圍是43.1~53.9 million;定位到參因組中的比例的范圍是88.8 ~ 91.7%(圖2-2B)。大約有95.9%的mapped sequeneads定位到外顯子區(qū)(圖2-2C)?傊,這些數(shù)據(jù)顯示RNA-Seq的數(shù)據(jù)是高質(zhì)量的表 2-3. 測(cè)序數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)表ample Reads Q20 (%) GC (%)0-1 61216586 93.69 51.760-2 61793042 95.01 51.6713-1 56638666 93.67 53.6713-2 69187806 94.33 53.06注:Q20(%)表示 Phred 數(shù)值大于 20 的堿基占總體堿基的百分比,GC content(%)表示 G 和 C 的數(shù)量總和占總的堿基數(shù)量的百分比。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)原理及其應(yīng)用[J]. 李麗娟,師書(shū)玥,張村宇,賀花,雷初朝,陳宏,黃永震. 中國(guó)畜牧雜志. 2019(02)
[2]肉雞MSMO1基因的克隆及表達(dá)模式分析[J]. 徐鳳華,宋琪,邢晉祎,孫煒涵. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2017(12)
[3]利用RNA-seq技術(shù)篩選大白豬皮下和肌內(nèi)脂肪組織差異表達(dá)基因[J]. 黃萬(wàn)龍,張秀秀,李嬡,苗向陽(yáng). 遺傳. 2017(06)
[4]番茄轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究進(jìn)展[J]. 劉冠,趙婷婷,楊歡歡,張冬野,姜景彬,李景富,許向陽(yáng). 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2016(10)
[5]北京鴨腹部脂肪組織的轉(zhuǎn)錄組特征分析[J]. 陳黎,李國(guó)勤,田勇,沈軍達(dá),陶爭(zhēng)榮,徐堅(jiān),曾濤,盧立志. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2016(05)
[6]基于RNA-Seq識(shí)別山羊肉品質(zhì)候選基因[J]. 孟憲然,杜琛,王靜,付紹印,鄭竹清,張文廣,李金泉. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2015(08)
[7]高通量測(cè)序技術(shù)的發(fā)展及其在生命科學(xué)中的應(yīng)用[J]. 杜玲,劉剛,陸健,劉丑生,哈福. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2014(12)
博士論文
[1]KLF3和KLF15基因?qū)εG绑w脂肪細(xì)胞分化和脂質(zhì)代謝調(diào)控研究[D]. 郭紅芳.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2018
[2]延黃牛脂肪細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組學(xué)及相關(guān)功能基因?qū)Τ芍只饔玫难芯縖D]. 云巾宴.延邊大學(xué) 2018
[3]基于轉(zhuǎn)錄組桑葉DNJ類(lèi)多羥基生物堿合成關(guān)鍵酶基因的挖掘及分析[D]. 王篤軍.江蘇大學(xué) 2018
[4]銅代謝及銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白CTR1在小鼠脂肪組織中的功能研究[D]. 王超.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017
[5]豬皮下與內(nèi)臟脂肪組織mRNA轉(zhuǎn)錄組鑒定和差異分析[D]. 王滔.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[6]脂肪細(xì)胞分化相關(guān)因子基因表達(dá)在豬生長(zhǎng)過(guò)程中的變化規(guī)律研究[D]. 姜俊芳.浙江大學(xué) 2006
碩士論文
[1]維生素D受體在SD大鼠原代脂肪細(xì)胞分化過(guò)程中的表達(dá)規(guī)律及脂質(zhì)沉積研究[D]. 楊祎琦.陜西理工學(xué)院 2016
[2]ATP抑制小鼠3T3-L1前體脂肪細(xì)胞增殖的轉(zhuǎn)錄組分析[D]. 何劉軍.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]基于二代測(cè)序數(shù)據(jù)研究神經(jīng)母細(xì)胞瘤中的RNA編輯現(xiàn)象[D]. 史彩萍.華東師范大學(xué) 2014
[4]神經(jīng)肽Y對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖與分化的影響及其作用機(jī)制的研究[D]. 唐浩能.中南大學(xué) 2012
[5]棕色脂肪組織特異性基因在抵抗肥胖中作用的研究[D]. 孫慧.華中科技大學(xué) 2011
[6]西雜牛PPARγ2、PGC-1α、MEF2C基因表達(dá)量及其與肌內(nèi)脂肪含量、嫩度的相關(guān)分析[D]. 李健.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[7]骨髓間質(zhì)干細(xì)胞在高脂飼料誘導(dǎo)肥胖大鼠體內(nèi)的遷移分化[D]. 蔣茂瑩.重慶醫(yī)科大學(xué) 2009
[8]野豬、野家雜交豬及家豬LPL基因表達(dá)規(guī)律及定量比較研究[D]. 丁琳琳.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
本文編號(hào):3005642
【文章來(lái)源】:聊城大學(xué)山東省
【文章頁(yè)數(shù)】:48 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
脂肪細(xì)胞分化過(guò)程及關(guān)鍵調(diào)控因子的功能相互關(guān)系
2-1. 3T3-L1 前脂肪細(xì)胞在體外分化成為成熟脂肪細(xì)胞。色;(B)前脂肪細(xì)胞(D0)和脂肪細(xì)胞(D13)脂肪標(biāo)志基(**P<0.01. β-actin 作為內(nèi)參)檢測(cè)本進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析,由表2-2可見(jiàn),經(jīng)過(guò)質(zhì)量(D0-1、D0-2、D13-1和D13-2)RNA完整性指數(shù)RIN ≥ 9.0;OD 260/OD 280 ≥ 2.0;28 S/18 S的污染,同時(shí)也沒(méi)有降解,可以用于下一步的RN表 2-2. 樣本RNA質(zhì)量OD 260/OD 280 RIN 22.02 9.1 2.04 9.2 2.03 9.1
肪細(xì)胞(D0)和脂肪細(xì)胞(D13)中分別獲得了約120.5 million和122.8 million的cleeads;在四個(gè)樣品中,uniquely mapped reads 的范圍是43.1~53.9 million;定位到參因組中的比例的范圍是88.8 ~ 91.7%(圖2-2B)。大約有95.9%的mapped sequeneads定位到外顯子區(qū)(圖2-2C)?傊,這些數(shù)據(jù)顯示RNA-Seq的數(shù)據(jù)是高質(zhì)量的表 2-3. 測(cè)序數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)表ample Reads Q20 (%) GC (%)0-1 61216586 93.69 51.760-2 61793042 95.01 51.6713-1 56638666 93.67 53.6713-2 69187806 94.33 53.06注:Q20(%)表示 Phred 數(shù)值大于 20 的堿基占總體堿基的百分比,GC content(%)表示 G 和 C 的數(shù)量總和占總的堿基數(shù)量的百分比。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)原理及其應(yīng)用[J]. 李麗娟,師書(shū)玥,張村宇,賀花,雷初朝,陳宏,黃永震. 中國(guó)畜牧雜志. 2019(02)
[2]肉雞MSMO1基因的克隆及表達(dá)模式分析[J]. 徐鳳華,宋琪,邢晉祎,孫煒涵. 西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2017(12)
[3]利用RNA-seq技術(shù)篩選大白豬皮下和肌內(nèi)脂肪組織差異表達(dá)基因[J]. 黃萬(wàn)龍,張秀秀,李嬡,苗向陽(yáng). 遺傳. 2017(06)
[4]番茄轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究進(jìn)展[J]. 劉冠,趙婷婷,楊歡歡,張冬野,姜景彬,李景富,許向陽(yáng). 基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué). 2016(10)
[5]北京鴨腹部脂肪組織的轉(zhuǎn)錄組特征分析[J]. 陳黎,李國(guó)勤,田勇,沈軍達(dá),陶爭(zhēng)榮,徐堅(jiān),曾濤,盧立志. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2016(05)
[6]基于RNA-Seq識(shí)別山羊肉品質(zhì)候選基因[J]. 孟憲然,杜琛,王靜,付紹印,鄭竹清,張文廣,李金泉. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2015(08)
[7]高通量測(cè)序技術(shù)的發(fā)展及其在生命科學(xué)中的應(yīng)用[J]. 杜玲,劉剛,陸健,劉丑生,哈福. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2014(12)
博士論文
[1]KLF3和KLF15基因?qū)εG绑w脂肪細(xì)胞分化和脂質(zhì)代謝調(diào)控研究[D]. 郭紅芳.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2018
[2]延黃牛脂肪細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組學(xué)及相關(guān)功能基因?qū)Τ芍只饔玫难芯縖D]. 云巾宴.延邊大學(xué) 2018
[3]基于轉(zhuǎn)錄組桑葉DNJ類(lèi)多羥基生物堿合成關(guān)鍵酶基因的挖掘及分析[D]. 王篤軍.江蘇大學(xué) 2018
[4]銅代謝及銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白CTR1在小鼠脂肪組織中的功能研究[D]. 王超.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017
[5]豬皮下與內(nèi)臟脂肪組織mRNA轉(zhuǎn)錄組鑒定和差異分析[D]. 王滔.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[6]脂肪細(xì)胞分化相關(guān)因子基因表達(dá)在豬生長(zhǎng)過(guò)程中的變化規(guī)律研究[D]. 姜俊芳.浙江大學(xué) 2006
碩士論文
[1]維生素D受體在SD大鼠原代脂肪細(xì)胞分化過(guò)程中的表達(dá)規(guī)律及脂質(zhì)沉積研究[D]. 楊祎琦.陜西理工學(xué)院 2016
[2]ATP抑制小鼠3T3-L1前體脂肪細(xì)胞增殖的轉(zhuǎn)錄組分析[D]. 何劉軍.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[3]基于二代測(cè)序數(shù)據(jù)研究神經(jīng)母細(xì)胞瘤中的RNA編輯現(xiàn)象[D]. 史彩萍.華東師范大學(xué) 2014
[4]神經(jīng)肽Y對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖與分化的影響及其作用機(jī)制的研究[D]. 唐浩能.中南大學(xué) 2012
[5]棕色脂肪組織特異性基因在抵抗肥胖中作用的研究[D]. 孫慧.華中科技大學(xué) 2011
[6]西雜牛PPARγ2、PGC-1α、MEF2C基因表達(dá)量及其與肌內(nèi)脂肪含量、嫩度的相關(guān)分析[D]. 李健.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[7]骨髓間質(zhì)干細(xì)胞在高脂飼料誘導(dǎo)肥胖大鼠體內(nèi)的遷移分化[D]. 蔣茂瑩.重慶醫(yī)科大學(xué) 2009
[8]野豬、野家雜交豬及家豬LPL基因表達(dá)規(guī)律及定量比較研究[D]. 丁琳琳.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
本文編號(hào):3005642
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