暗紋東方鲀是我國南方重要的淡水養(yǎng)殖種類之一。暗紋東方鲀精巢營養(yǎng)價值很高,規(guī)�；B(yǎng)殖全雄暗紋東方鲀,能夠顯著提高我國養(yǎng)殖暗紋東方鲀的經(jīng)濟效益。本研究采用轉錄組學、生物信息學和分子生物學的方法,初步探究了暗紋東方鲀性別相關基因在早期發(fā)育過程中的分子調(diào)控機制。主要研究結果如下:1.暗紋東方鲀幼魚遺傳性別的鑒定采用ARMS-PCR技術快速檢測暗紋東方鲀的遺傳性別。根據(jù)暗紋東方鲀amhr2激酶結構域內(nèi)存在一個與性別連鎖的錯義突變SNP位點,設計特異等位基因引物,即在下游PCR引物3’末端不同堿基位點設計不同種類的錯配堿基,進行特異性引物的篩選,并通過優(yōu)化PCR反應體系與反應條件,建立暗紋東方鲀幼魚遺傳性別差異鑒定的ARMS-PCR方法。此外,為了判斷ARMS-PCR方法鑒定暗紋東方鲀幼魚遺傳性別的可行性,我們同時利用直接測序法和組織切片法分別鑒定樣品的遺傳性別和表型性別。結果表明,利用ARMS-PCR方法可以快速區(qū)分暗紋東方鲀的遺傳性別,并且ARMS-PCR方法的鑒定結果與直接測序結果相同,同時也與組織切片鑒定的表型性別一致。2.暗紋東方鲀早期發(fā)育階段性腺組織的轉錄組分析對孵化后60^1... 

【文章來源】：上海海洋大學上海市

【文章頁數(shù)】：116 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

暗紋東方鲀性腺的組織學形態(tài)

暗紋東方鲀性別差異等位基因 PCR 擴on of sex difference allele sequence fragmF 表示雌魚，M 表示雄魚。 denotes female fish and M denotes male f圖 2-3 暗紋東方鲀雌雄個體的 SNP 分型P typing of male and female individuals in特異性的鑒定及反應條件的優(yōu)化PCR 擴增稀釋產(chǎn)物（50 倍稀釋）的產(chǎn)物來鑒定引物的特異性。5 對

圖 2-3 暗紋東方鲀雌雄個體的 SNP 分型 SNP typing of male and female individuals in T.物特異性的鑒定及反應條件的優(yōu)化的 PCR 擴增稀釋產(chǎn)物（50 倍稀釋）為模增的產(chǎn)物來鑒定引物的特異性。5 對特70bp 的目的 DNA 片段（圖 2-4a，b，f，8 和引物 F1/inter R9 在雌性個體中擴增，h，i）。引物 F1/inter R3 和引物 F1/i圖 2-4c，e）。引物 F1/inter R4 在雌性個個體中均擴增出目的 DNA 片段（圖 2-4顯擴增條帶，僅在雄性個體中擴增出 1。er R7，對擴增條件進行優(yōu)化，如設置模量減半等，結果表明引物在模板稀釋200時擴增效果最好。


本文編號：3004079