馬鈴薯（Solanum tuberosum L.）是全球第四大糧食作物,僅次于小麥、稻谷和玉米。2015年,農業(yè)部將馬鈴薯主糧化工作列入重要議程。馬鈴薯在我國的種植范圍很廣,環(huán)境脅迫是限制馬鈴薯產量和品質進一步提高的主要瓶頸之一。馬鈴薯在受到環(huán)境脅迫后,會有不同程度的減產,嚴重的甚至減產70%左右。前期,我們從煙草中克隆得到一個編碼非特異性脂轉移蛋白的基因Nt LTP4,研究表明,超表達Nt LTP4基因能夠增強煙草對非生物脅迫和生物脅迫的耐受性。在此基礎上,本研究開展了Nt LTP4基因轉化馬鈴薯的研究,培育獲得了抗鹽堿、干旱和青枯病的馬鈴薯新種質,為馬鈴薯品種改良奠定了基礎。主要的研究結果和結論如下:（1）ubi3啟動子的克隆及表達活性分析利用PCR技術,從馬鈴薯克隆了ubi3啟動子,該啟動子長度為921bp。將ubi3啟動子插入p X6載體中,獲得載體ubi3::p X6。進而,在載體ubi3::p X6中ubi3啟動子的下游插入GFP基因,構建帶GFP標簽植物表達載體ubi3::p X6-GFP。用載體ubi3::p X6-GFP侵染煙草,2d后在上部葉片觀察到熒光,說明ubi... 

【文章來源】：山東農業(yè)大學山東省

【文章頁數】：67 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

重組植物表達載體的構建策略A:ubi3啟動子GFP表達載體的構建；B:NtLTP4過表達載體的構建Fig.2-1ConstructionstrategyofrecombinantplantexpressionvectorA:constructionoftheubi3promoterGFPexpressionvector.B:NtLTP4overexpressionoftheconstruct.

分析瞬時表達載體，轉化到農，每天觀察葉片是否有熒圖 3-2），表明 ubi3 具有2 dpi圖 3-1 PCR 擴增產物的瓊脂糖凝膠電PCR 產物的分析；1-7：ubi3 基因的Fig. 3-1 Cloning of the ubi3 promotR analysis of the liquid culture. 1-7: P

圖 3-1 PCR 擴增產物的瓊脂糖凝膠電泳動子的克隆；B：菌液 PCR 產物的分析；1-7：ubi3 基因的 PCR 產物；N：陰性對照；MFig. 3-1 Cloning of the ubi3 promotertion of ubi3 gene. B: PCR analysis of the liquid culture. 1-7: PCR product of ubi3 gene. N: neg

【參考文獻】：
期刊論文
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[2]馬鈴薯抗旱節(jié)水豐產高效技術研究與示范[J]. 劉羽,劉富強,云庭,侯佳秀,張智芳,李樹生,昊翔,石曉華,孫宇燕,梁東超,雷利君,馬麗榮.  北方農業(yè)學報. 2019(01)
[3]馬鈴薯晚疫病的危害及防治措施[J]. 黃強,鄭敏,王釧,舒婷,歐陽滿.  江西農業(yè). 2019(02)
[4]馬鈴薯雜交育種的障礙及解決途徑[J]. 李峰,王志剛,王占海,金穎璐,楊茜,安倩倩.  農業(yè)開發(fā)與裝備. 2019(01)
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[10]模擬干旱脅迫下馬鈴薯StNCED1表達量及與ABA含量的相關性分析[J]. 鞏檑,宋繼玲,甘曉燕,劉璇,陳虞超,郭志乾,宋玉霞.  植物遺傳資源學報. 2018(03)

博士論文
[1]非特異性脂轉移蛋白NtLTP4作為正調控因子參與煙草對非生物和生物脅迫的響應[D]. 徐揚.山東農業(yè)大學 2018
[2]馬鈴薯油菜素內酯合成限速酶基因StCPD和StDWF4對干旱和鹽脅迫的響應[D]. 周香艷.甘肅農業(yè)大學 2016
[3]原生質體融合創(chuàng)造抗青枯病的馬鈴薯新種質及其遺傳分析[D]. 蔡興奎.華中農業(yè)大學 2004

碩士論文
[1]馬鈴薯StCPI基因的分子克隆、表達純化及抗逆功能表征[D]. 李亞倫.山東農業(yè)大學 2018
[2]轉SPDS基因馬鈴薯植株耐寒性的研究[D]. 楊金輝.湖南農業(yè)大學 2016
[3]煙草NtLTP4基因的克隆及功能分析[D]. 鄭新新.山東農業(yè)大學 2016
[4]滲透脅迫下馬鈴薯試管苗結構與生理響應以及StSnRK2基因表達的研究[D]. 高慧娟.甘肅農業(yè)大學 2015
[5]AtCBF3提高轉基因馬鈴薯耐熱性的研究[D]. 竇海鷗.山東農業(yè)大學 2014
[6]農桿菌介導hrap基因的馬鈴薯遺傳轉化及抗病性鑒定[D]. 蔣敏華.南京農業(yè)大學 2007



本文編號：2993097