聚酮類化合物是自然界中一類重要的具有生物活性和結(jié)構(gòu)多樣性的化合物。該類化合物由�；o酶A前體經(jīng)聚酮合成酶（PKSs）生物合成。利用組合生物合成技術(shù)形成雜交PKSs被認(rèn)為是開發(fā)新型聚酮化合物的一種很好的途徑。本文對(duì)基因工程菌株Streptomyces avermitilis TM24的活性成分進(jìn)行了初步研究,包括S.avermitilis TM24代謝產(chǎn)物的分離鑒定,以及所得化合物的殺螨和殺蟲活性測(cè)定。1、基因工程菌株S.avermitilis TM24次級(jí)代謝產(chǎn)物的分離與鑒定。將30L基因工程菌株S.avermitilis TM24發(fā)酵液過(guò)濾、菌體經(jīng)乙醇萃取、濃縮得到258 g浸膏。浸膏經(jīng)硅膠柱層析（100-200目）、凝膠柱層析（Sephadex LH-20）、高效液相色譜法（C-18和C-3柱）等分離純化得到12個(gè)化合物。利用核磁共振、高分辨質(zhì)譜、紅外、紫外等波譜分析方法對(duì)其進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定,鑒定結(jié)果表明其中兩個(gè)分別為天維菌素A和天維菌素B,其余10個(gè)為新化合物,命名為Tenvermectin F（1）,Tenvermectin G（2）,Tenvermectin H（3）,Tenve... 

【文章來(lái)源】：浙江農(nóng)林大學(xué)浙江省

【文章頁(yè)數(shù)】：112 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

阿維菌素類結(jié)構(gòu)

文獻(xiàn)綜述5圖1.2 阿維菌素生物合成基因簇Figure 1.2 The gene cluster of avermectin biosynthesis阿維菌素是活性很好的殺蟲、殺螨劑，由于在市場(chǎng)上作為一種高效生物源殺蟲劑而占有一席之地，因而對(duì)運(yùn)用組合生物合成的方法對(duì)菌株進(jìn)行基因改造以提高阿維菌素的產(chǎn)量一直備受關(guān)注。一方面，人們通過(guò)基因改造提高菌株的生產(chǎn)能力。首爾國(guó)立大學(xué)的 Hwang 等將一段 8.0kb 的 orfX 基因轉(zhuǎn)入野生型除蟲鏈霉菌中，阿維菌素的產(chǎn)量增加了近 3.5 倍[36]。Chen 等發(fā)現(xiàn) aveI 基因的缺失導(dǎo)致阿維菌素 B1a 組分的產(chǎn)量提高了 16 倍[37]。另一方面，人們通過(guò)阻止無(wú)效組分或化合物(寡霉素等)的合成，引導(dǎo)代謝合成途徑向 B1a 組分的生物合成方向發(fā)展。Schulman 等[38]使 aveD 基因突變，得到只有 B 組分的產(chǎn)物。此外

圖 1.7 阿維菌素和米爾貝霉素生物合成基因簇的 PKS 基因及其模塊組Figure1.7 PKS gene and module organizations of avermectin and milbemycin biosynthetic geneclusters.米爾貝霉素具有較強(qiáng)的殺螨和殺蟲活性，其毒性較低，具有較高的商業(yè)價(jià)值。作機(jī)理同阿維菌素，不易產(chǎn)生抗性，與其他殺蟲劑無(wú)交叉抗性，可作為產(chǎn)生抗性害蟲治的復(fù)配及輪換用藥。隨著阿維菌素及其衍生物的抗性日益增強(qiáng)，因此利用組合生合成的辦法，開發(fā)一種高效利用過(guò)剩宿主菌株大規(guī)模生產(chǎn)米爾貝霉素及其新型類似勢(shì)在必行。Myoun 等[54]運(yùn)用組合生物合成技術(shù)，把阿維菌素高產(chǎn)菌株阿維鏈霉菌A-01 中的聚酮合成酶(PKS)的 AveA1 和 AveA3(或 AveA3 中的模塊 7)分別用米爾貝素 PKS 中的 MilA1 和 MilA3(或 MilA3 中的模塊 7)替代，結(jié)果產(chǎn)生少量米爾貝霉素3，A4 和 D，其主要產(chǎn)物為 C5-O-甲基米爾貝霉素 B2，B3 和 G。C5-O-甲基轉(zhuǎn)移酶veD 的失活導(dǎo)致米爾貝霉素 A3/A4(商業(yè)產(chǎn)品米爾貝菌素的主要成分)的產(chǎn)量增加，隨產(chǎn)生微量的米爾貝霉素 D.


本文編號(hào)：2992125