玉米ZmPCK2基因的功能分析
發(fā)布時(shí)間：2021-01-01 00:57
玉米是一年生禾本科的草本植物,是重要的糧食作物和飼料來源。隨著我國經(jīng)濟(jì)不斷發(fā)展,人口數(shù)量逐年遞增,玉米深加工業(yè)的快速發(fā)展,國內(nèi)市場對玉米的需求量越來越大。因此,創(chuàng)制高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的玉米新種質(zhì),培育玉米新品種具有重要意義。在玉米中,發(fā)現(xiàn)了兩個(gè)磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）基因,分別為ZmPCK1和ZmPCK2,ZmPCK2基因表達(dá)部位主要在胚乳和發(fā)育的胚中,該基因可能影響玉米產(chǎn)量和玉米籽粒品質(zhì),因此,本研究通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法,將三種植物表達(dá)載體pCRISPR/Cas9-ZmPCK2、pCAMBIA3301-35S-ZmPCK2-Nos-GFP、pCAMBIA3301-35S-ZmPCK2-Nos-RNAi轉(zhuǎn)入到玉米中,以H99玉米愈傷組織為受體材料,進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。通過對轉(zhuǎn)基因植株的分子檢測、農(nóng)藝性狀調(diào)查和轉(zhuǎn)基因種子的品質(zhì)性狀檢測,進(jìn)一步驗(yàn)證ZmPCK2基因的功能,為玉米品質(zhì)性狀改良奠定基礎(chǔ)。得到的實(shí)驗(yàn)成果如下:1.采用玉米幼胚為受體材料,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)植物表達(dá)載體pCAMBIA1300-35S-GUS-Nos侵染玉米幼胚,以GUS基因瞬時(shí)表達(dá)率為指標(biāo),通過單因素試驗(yàn)及四因素三水平正交試...
【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省
【文章頁數(shù)】：66 頁
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌的PCR驗(yàn)證A.pCRISPR/Cas9-ZmPCK2的驗(yàn)證；B.pCAMBIA3301-35S-ZmPCK2-Nos-GFP的驗(yàn)證；
圖 3.3 T0代轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測A：T0代 CRISPR/Cas9 轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測；B：T0代過表達(dá)載體轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測；C：T0代干擾載體轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測；M：DL2000Marker；P：陽性對照；N：陰性對照；CK：非轉(zhuǎn)基因植株；1-5：轉(zhuǎn)基因植株；Fig.3.3 PCR detection of T0transgenic plantsA：T0generation CRISPR/Cas9 transgenic plants PCR detection；B：T0generation of expressionvector transgenic plants PCR detection.C：T0generation of interfering expression vector transgenicplants PCR detection.M：DL2000Marker；P：Positive control；N：Water；CK：Negative control；1-5：Positive plants；圖 3.4 T1代轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測D：T1代 CRISPR/Cas9 轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測；E：T1代過表達(dá)載體轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測；F：T1代干擾載體轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測；M：DL2000Marker；P：陽性對照；N：陰性對照；
果如圖 3.3-3.6 所示：圖 3.3 T0代轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測A：T0代 CRISPR/Cas9 轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測；B：T0代過表達(dá)載體轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測；C：T0代干擾載體轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測；M：DL2000Marker；P：陽性對照；N：陰性對照；CK：非轉(zhuǎn)基因植株；1-5：轉(zhuǎn)基因植株；Fig.3.3 PCR detection of T0transgenic plantsA：T0generation CRISPR/Cas9 transgenic plants PCR detection；B：T0generation of expressionvector transgenic plants PCR detection.C：T0generation of interfering expression vector transgenicplants PCR detection.M：DL2000Marker；P：Positive control；N：Water；CK：Negative control；1-5：Positive plants；
本文編號(hào)：2950635
【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省
【文章頁數(shù)】：66 頁
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌的PCR驗(yàn)證A.pCRISPR/Cas9-ZmPCK2的驗(yàn)證；B.pCAMBIA3301-35S-ZmPCK2-Nos-GFP的驗(yàn)證；
圖 3.3 T0代轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測A：T0代 CRISPR/Cas9 轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測；B：T0代過表達(dá)載體轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測；C：T0代干擾載體轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測；M：DL2000Marker；P：陽性對照；N：陰性對照；CK：非轉(zhuǎn)基因植株；1-5：轉(zhuǎn)基因植株；Fig.3.3 PCR detection of T0transgenic plantsA：T0generation CRISPR/Cas9 transgenic plants PCR detection；B：T0generation of expressionvector transgenic plants PCR detection.C：T0generation of interfering expression vector transgenicplants PCR detection.M：DL2000Marker；P：Positive control；N：Water；CK：Negative control；1-5：Positive plants；圖 3.4 T1代轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測D：T1代 CRISPR/Cas9 轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測；E：T1代過表達(dá)載體轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測；F：T1代干擾載體轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測；M：DL2000Marker；P：陽性對照；N：陰性對照；
果如圖 3.3-3.6 所示：圖 3.3 T0代轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測A：T0代 CRISPR/Cas9 轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測；B：T0代過表達(dá)載體轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測；C：T0代干擾載體轉(zhuǎn)基因植株 PCR 檢測；M：DL2000Marker；P：陽性對照；N：陰性對照；CK：非轉(zhuǎn)基因植株；1-5：轉(zhuǎn)基因植株；Fig.3.3 PCR detection of T0transgenic plantsA：T0generation CRISPR/Cas9 transgenic plants PCR detection；B：T0generation of expressionvector transgenic plants PCR detection.C：T0generation of interfering expression vector transgenicplants PCR detection.M：DL2000Marker；P：Positive control；N：Water；CK：Negative control；1-5：Positive plants；
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