開發(fā)了一種新型的集腫瘤靶向識別及基因傳遞功能一體的遞送系統(tǒng)用于腫瘤的診斷及治療。碳量子點（CDs）為載體的核心部分,使其具有熒光成像的作用,鍵合正電荷密度較高的枝狀聚乙烯亞胺（bPEI,1000Da）,可緊密結(jié)合DNA并可通過“質(zhì)子海綿作用”促進(jìn)內(nèi)涵體逃逸;通過細(xì)胞膜表面的免疫逃逸蛋白和同源靶向蛋白作用為納米粒子提供靶向性。1.CDs及其PEI修飾載體的合成和表征通過微波合成法將尿素和檸檬酸以2:1的比例合成CDs,利用TEM對其形貌進(jìn)行表征,結(jié)果顯示CDs粒徑在5 nm左右,且分散均勻;FTIR結(jié)果表明CDs富含羧基（-COOH）;紫外最大吸收波長為411 nm,熒光光譜顯示在460 nm激發(fā)下最大發(fā)射波長為535 nm。CDs與可有效壓縮DNA的bPEI發(fā)生�；磻�(yīng),使CDs-PEI表面帶有正電荷,TEM結(jié)果顯示CDs-PEI粒徑約為10 nm,FTIR結(jié)果顯示出現(xiàn)酰胺鍵（-CO-NH-）和氨基（-NH₂）,表明PEI成功鍵合在CDs上。DLS結(jié)果顯示CDs鍵合PEI后電位由-16.5 mV升高至24 mV。CDs-PEI紫外最大吸收波長為335 nm,熒光光... 

【文章來源】：大連理工大學(xué)遼寧省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 基因治療簡介
    1.2 腫瘤基因治療發(fā)展現(xiàn)狀
    1.3 腫瘤基因治療策略
        1.3.1 基因沉默治療
        1.3.2 抑癌基因治療
        1.3.3 免疫基因治療
        1.3.4 抗腫瘤血管生成治療
        1.3.5 腫瘤多藥耐藥基因治療
        1.3.6 抗端粒酶治療
        1.3.7 多基因聯(lián)合治療
    1.4 基因治療載體
        1.4.1 病毒載體
        1.4.2 非病毒載體
    1.5 熒光納米材料
    1.6 細(xì)胞膜靶向研究進(jìn)展
    1.7 本論文的選題依據(jù)及研究內(nèi)容
2 載體CDs和CDs-PEI的合成與表征
    2.1 試劑和儀器
        2.1.1 試劑
        2.1.2 儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 載體CDs和CDs-PEI的合成
        2.2.2 傅立葉紅外光譜分析（FTIR）
        2.2.3 透射電鏡分析（TEM）
        2.2.4 紫外吸收光譜分析
        2.2.5 熒光光譜分析
        2.2.6 熒光量子產(chǎn)率分析
        2.2.7 緩沖能力
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 載體CDs和CDs-PEI的合成與表征
        2.3.2 光學(xué)性能表征
        2.3.3 緩沖能力
    2.4 小結(jié)
3 CDs-PEI及CDs-PEI/M遞送外源基因能力的研究
    3.1 試劑和儀器
        3.1.1 試劑
        3.1.2 儀器
    3.2 實驗方法
        3.2.1 CDs-PEI/pDNA和CDs-PEI/pDNA/M的制備及表征
        3.2.2 CDs-PEI/pDNA和CDs-PEI/pDNA/M復(fù)合物的穩(wěn)定性
        3.2.3 CDs-PEI/pDNA和CDs-PEI/pDNA/M復(fù)合物的DNaseI消化保護(hù)實驗
        3.2.4 CDs-PEI/pDNA和CDs-PEI/pDNA/M復(fù)合物的血清保護(hù)實驗
        3.2.5 細(xì)胞毒性
        3.2.6 CDs-PEI/pDsRed2-N1和CDs-PEI/pDsRed2-N1/M體外轉(zhuǎn)染
        3.2.7 抑癌實驗
        3.2.8 統(tǒng)計學(xué)分析
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 CDs-PEI/pDNA和CDs-PEI/pDNA/M復(fù)合物的制備及表征
        3.3.2 CDs-PEI和CDs-PEI/M結(jié)合pDNA的能力
        3.3.3 CDs-PEI/pDNA和CDs-PEI/pDNA/M復(fù)合物的DNaseI消化保護(hù)實驗
        3.3.4 CDs-PEI/pDNA和CDs-PEI/pDNA/M復(fù)合物的血清保護(hù)實驗
        3.3.5 細(xì)胞毒性
        3.3.6 CDs-PEI/pDsRed2-N1和CDs-PEI/pDsRed2-N1/M體外轉(zhuǎn)染
        3.3.7 抑癌實驗
    3.4 小結(jié)
4 細(xì)胞膜的靶向性能研究
    4.1 試劑與儀器
        4.1.1 試劑
        4.1.2 儀器
    4.2 實驗方法
        4.2.1 不同細(xì)胞膜包覆的CDs-PEI/M的細(xì)胞攝取
        4.2.2 不同細(xì)胞膜包覆的CDs-PEI/pDsRed2-N1/M體外轉(zhuǎn)染
        4.2.3 細(xì)胞凋亡實驗
        4.2.4 統(tǒng)計學(xué)分析
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 不同細(xì)胞膜包覆的CDs-PEI/M的細(xì)胞攝取
        4.3.2 不同細(xì)胞膜包覆的CDs-PEI/pDsRed2-N1/M體外轉(zhuǎn)染
        4.3.3 細(xì)胞凋亡實驗
    4.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Reversal of multi-drug resistance by pSUPER-shRNA-mdr1 in vivo and in vitro[J]. Guang-Dong Pan,Jian-Qing Yang,Lv-Nan Yan,Guang-Ping Chu,Qiang Liu,Yi Xiao,Lin Yuan,Department of General Surgery,People’s Hospital of Liuzhou,Medical University of Guangxi,Liuzhou 545001,Guangxi Zhuang Autonomous Region,China.  World Journal of Gastroenterology. 2009(04)
[2]基因治療及其研究[J]. 陶銘.  生物學(xué)通報. 2008(04)
[3]陽離子脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染機(jī)制及轉(zhuǎn)染效率影響因素[J]. 陳彥祥,喬衛(wèi)紅,劉棟良,李宗石.  生物工程學(xué)報. 2007(05)



本文編號：2948657