【摘要】：胞膜窖(Caveolae)是細胞質(zhì)膜表面特異性內(nèi)陷微區(qū),主要由脂類和蛋白質(zhì)組成。窖蛋白(Caveolins)是Caveolae的表面標(biāo)記蛋白,是構(gòu)成Caveolae的完整膜蛋白。窖蛋白至少有3種亞型,其中Caveolin-1(Cav-1)是Caveolae最重要的表面功能蛋白。胞膜窖和窖蛋白在多種細胞生物學(xué)功能中起關(guān)鍵作用。已有的研究表明Cav-1參與牙胚發(fā)育過程。Shh是高度保守的信號通路,參與多個器官的發(fā)育過程。在牙胚發(fā)育中Shh信號持續(xù)存在,調(diào)控牙源性上皮區(qū)域的確定,牙尖的發(fā)育和牙根的形成,并在確定牙齒數(shù)目中有重要作用。研究表明Cav-1可協(xié)助Shh從胞內(nèi)運輸至細胞表面。雖然Cav-1和Shh都參與牙胚發(fā)育,兩者又有功能上的聯(lián)系,但牙胚發(fā)育過程中Cav-1與Shh信號通路間是否存在調(diào)控關(guān)系尚不明確。目的通過對比觀察Cav-1基因敲除小鼠與野生型小鼠下頜第一磨牙牙胚早期發(fā)育過程中Shh信號通路的表達,探討Cav-1與Shh信號通路時空表達模式的關(guān)系,為深入研究Cav-1在牙齒發(fā)育中的作用提供參考。方法收集胚胎發(fā)育13.5,14.5,15.5,16.5,17.5及18.5天的Cav-1基因敲除小鼠(KO)和同源野生型小鼠(WT)的下頜第一磨牙牙胚,經(jīng)聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)及免疫組織化學(xué)技術(shù)鑒定基因型。免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測Shh、Ptc-1、Ptc-2、Gli-1、Gli-2在不同發(fā)育時期牙胚組織中的表達,并行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果Shh、Ptc-1、Ptc-2、Gli-1、Gli-2在E13.5-E18.5,WT和KO胎鼠的下頜第一磨牙牙胚中均有表達,并呈現(xiàn)出不同的表達模式。Shh蛋白在上皮芽的頂端可見陽性表達,帽狀期特異性地表達于釉結(jié)部位,鐘狀期表達于成釉細胞層。Ptc-1在E13.5表達于上皮芽及周圍間充質(zhì)中,E14.5-E17.5天表達于外釉上皮、內(nèi)釉上皮、星網(wǎng)狀層、中間層及鄰近內(nèi)釉上皮的牙乳頭細胞中,E18.5天,外釉上皮、成釉細胞、中間層仍可見Ptc-1表達,但牙乳頭中未檢測到Ptc-1表達。Ptc-2在成釉器中的表達模式類似于Ptc-1,但在牙乳頭中未能檢測到Ptc-2的表達。Gli-1,Gli-2表達模式相似,E13.5表達于上皮芽及周圍間充質(zhì)中,E14.5-E18.5天,表達于成釉器的各層細胞和牙乳頭細胞。而同時期的WT和KO兩者之間Shh信號通路的蛋白表達水平無顯著性差異。結(jié)論Cav-1基因敲除對小鼠下頜第一磨牙牙胚早期發(fā)育中Shh信號通路的時空表達模式無顯著性影響。
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R781

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前2條

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相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

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本文編號：2806814