【摘要】：黃瓜(CucumissativusL.),2n=2x=14,為葫蘆科甜瓜屬一年生草本蔓生攀緣植物,是世界重要的蔬菜之一,在蔬菜作物周年供應(yīng)中占有重要的地位。隨著黃瓜全基因組測序的完成,為黃瓜分子標(biāo)記輔助育種、基因定位和功能驗證及其它方面提供了極大的便利。分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)被廣泛的應(yīng)用到作物遺傳育種當(dāng)中。為了將黃瓜自交系H19中的小葉基因(Little Leaf)轉(zhuǎn)入到其它不同生態(tài)型的黃瓜當(dāng)中,本實驗以華北鮮食型黃瓜9930和北美加工型黃瓜Gy14為受體親本材料,黃瓜自交系小葉材料H19為供體親本材料,利用一次雜交、兩次回交、一次自交以及三次分子標(biāo)記輔助選擇,分別構(gòu)建小葉基因在不同遺傳背景下的近等基因系。具體結(jié)果如下:1.利用覆蓋黃瓜全基因組的288對SSR標(biāo)記,以親本組合9930×H19、Gy14×H19為模板,分別在兩對組合中篩選出在黃瓜7條染色體上均勻分布且有顯著差異的102對和88對SSR標(biāo)記用于分子標(biāo)記輔助的背景選擇。兩親本組合篩選得到的標(biāo)記間平均間距分別為1.61Mb和2.18Mb,標(biāo)記密度適中,適合應(yīng)用于各世代的背景選擇。2.構(gòu)建小葉基因近等基因系,利用與目標(biāo)基因共分離的dCAPS標(biāo)記為前景選擇標(biāo)記,篩選出的102對和88對SSR標(biāo)記為背景選擇標(biāo)記,分別在BC1F1、BC2F1和BC2F2進行分子輔助選擇。在9930×H19組合中,最終在BC2F2群體的54個候選單株中篩選出10株含有小葉基因且背景回復(fù)率最高的單株;Gy14×H19組合中,從BC2F1群體中的43個候選單株選擇出10株背景回復(fù)率高的單株進行下一步的自交。3.利用Graphical GenoTypes軟件對各世代回交群體的入選單株進行圖示基因型分析。通過圖示基因型分析表明,在9930遺傳背景下,BC2F1和BC2F2代群體遺傳背景均得到較高的回復(fù),平均遺傳背景回復(fù)率分別達(dá)到了 90.2%和92.22%,基本符合預(yù)期;在Gy14遺傳背景下,BC1F1和BC2F1代群體平均遺傳背景回復(fù)率為66.45%和69.19%。本研究利用分子標(biāo)記輔助選擇快速構(gòu)建小葉基因在不同遺傳背景中的近等基因系,為我們研究該基因在不同背景中的表現(xiàn),也為后續(xù)深入研究小葉基因的功能及其調(diào)控器官大小的作用機理提供了堅實的材料基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S642.2
【圖文】：

圖 3-2 9930×H19、Gy14×H19 組合所選標(biāo)記在染色體組上的具體位置分布Fig.3-2 The specific chromos location of selected markers in 9930×H19&Gy14×H19注：A、B 分別為 9930×H19、Gy14×H19 組合背景選擇標(biāo)記在染色體組上的分布。Note：A and B respect the specific chromos location of background selected markers in 9930×H19&Gy14×H19.3.2 BC1F1、BC2F1群體候選單株的篩選3.2.1 BC1F1群體分析在 9930×H19 的 51 株 BC1F1群體中通過 dCAPS 標(biāo)記前景選擇，篩選出 28 株基因型為雜合碩點 Ll 的單株，用 102 對 SSR 標(biāo)記對 28 個 BC1F1群體單株進行背景回復(fù)率分析，結(jié)果顯示，該群體背景回復(fù)率平均值為 73.67%，最高的單株可達(dá) 84.31%，最低的僅 57.84%。大部分單株的背景回復(fù)率都在 72%以上，其中有 3 株的背景回復(fù)率超過了 80%。以遺傳背景回復(fù)率達(dá) 79%以上為標(biāo)

圖 3-3 9930×H19 組合 BC1F1群體前景選擇及背景選擇部分電泳結(jié)果Fig.3-3 The electrophoresis results of FS and BS in BC1F1population of 9930×H19注： A 為前景選擇結(jié)果，1 和 3、2 和 4 分別為親本 9930 經(jīng) dCAPS 標(biāo)記擴增酶切前后的擴增條帶，5 和 6 分別為H19 酶切前后擴增條帶，7 到 12 為部分 BC1F1群體單株酶切后的的條帶；B 為某一背景選擇標(biāo)記的擴增結(jié)果，1 和2 分別為親本 9930、H19，3 到 30 為 BC1F1群體單株的擴增結(jié)果；M 為 Marker。Note： A is the results of foreground selection，1&3、2&4 and 5、6 respectively are the electrophoresis reslts of dCPASmarker in 9930&H19，7 to 12 are the enzymatic results in BC1F1population；B is the results of background selection，1 and2 are the electrophoresis results of SSR marker in parents 9930 and H19，3 to 30 are the electrophoresis results of SSRmarker in in BC1F1population ；M is Marker.在 82 株 Gy14×H19 的 BC1F1群體中，通過前景選擇篩選出 35 株基因型為雜合碩點 Ll 的單株，用 88 對 SSR 標(biāo)記的篩選出的 35 個 BC1F1群體單株進行背景回復(fù)率分析，結(jié)果顯示，該群體背景

23圖 3-4 BC1F1群候選單株圖示基因型Fig.3-4 Graphical genotypes for the candidate plant of BC1F1population注：A、B 分別為 9930 和 Gy14 背景下的 BC1F1群體單株圖示基因型，圖示基因型中灰色和黑色分別代表輪回親本遺傳背景和供體親本導(dǎo)入的染色體片段。Note:A & B represent graphical genotypes of BC1F1population in 9930 and Gy14 genetic background.Graphicrepresentation of the genotypic make-up for the recurrent parent 9930 and Gy14(gray), the donor parent H19(black).

【參考文獻(xiàn)】

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1 譚華;鄭德波;鄒成林;韋新興;黃愛花;吳永升;莫潤秀;蔣維萍;韋慧;黃開健;;利用分子標(biāo)記輔助選擇優(yōu)質(zhì)蛋白玉米近等基因系[J];中國農(nóng)學(xué)通報;2015年15期

2 畢研飛;徐兵劃;郭靜;張永兵;伊鴻平;錢春桃;陳勁楓;;分子標(biāo)記輔助甜瓜抗蔓枯病基因聚合及‘白皮脆’品種改良[J];南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2015年03期

3 徐兵劃;錢春桃;王紅英;畢研飛;婁群峰;張永兵;伊鴻平;陳勁楓;;甜瓜蔓枯病抗性聚合材料中防衛(wèi)基因的表達(dá)分析[J];南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2014年05期

4 張振乾;肖鋼;官春云;;甘藍(lán)型油菜近等基因系構(gòu)建及應(yīng)用研究進展[J];作物雜志;2013年05期

5 張騰;吳迪;趙卓;王哲;樸鐘云;;大白菜抗根腫病近等基因系的選育及其評價[J];分子植物育種;2012年06期

6 李莉;邢躍先;趙賢容;王丕武;檀國慶;;利用分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)提高玉米對絲黑穗病的抗性[J];植物保護學(xué)報;2012年04期

7 孟佳麗;婁群峰;周曉慧;史建磊;陳勁楓;;黃瓜-酸黃瓜染色體片段導(dǎo)入系群體的構(gòu)建及果實相關(guān)數(shù)量性狀基因的定位[J];中國農(nóng)業(yè)科學(xué);2012年08期

8 苗晗;顧興芳;張圣平;張忠華;黃三文;王燁;程周超;張若緯;穆生奇;李曼;張振賢;方智遠(yuǎn);;黃瓜果實相關(guān)性狀QTL定位分析[J];中國農(nóng)業(yè)科學(xué);2011年24期

9 李學(xué)峰;胡曉文;張圣平;顧興芳;張忠華;黃三文;;野生黃瓜代換系的構(gòu)建[J];園藝學(xué)報;2011年05期

10 史建磊;婁群峰;錢春桃;萬紅建;周曉慧;陳勁楓;;黃瓜染色體片段導(dǎo)入系的構(gòu)建與遺傳評價[J];南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2011年01期

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1 吳迪;張騰;敬靜;陳慧慧;樸鐘云;;具抗根腫病基因CRb大白菜近等基因系的分子標(biāo)記前景和背景選擇[A];中國園藝學(xué)會2010年學(xué)術(shù)年會論文摘要集[C];2010年

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1 潘玉朋;黃瓜圓形果的QTL定位及無表皮毛（果刺）基因csgl3的圖位克隆[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2016年

2 程春燕;黃瓜/酸黃瓜漸滲系抗南方根結(jié)線蟲的遺傳及抗性機制研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

3 陳麗萍;利用近等基因系對水稻抽穗期QTL-DTH3b的精細(xì)定位及長芒基因Awn3的克隆[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

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1 張敏慧;番茄果實大小的QTL定位[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

2 陳靜;甜瓜染色體片段代換系的構(gòu)建和抗白粉病基因的遺傳定位[D];新疆大學(xué);2015年

3 盛浩聞;水稻湘資3150抗稻瘟病基因Pi48的精細(xì)定位與克隆及近等基因系構(gòu)建[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

4 劉雪嬌;黃瓜/酸黃瓜漸滲系抗南方根結(jié)線蟲病相關(guān)抗性機制及QTLs定位研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

5 徐未未;分子標(biāo)記輔助培育水稻萬金B(yǎng)抗稻瘟病近等基因系與基因聚合系[D];廣東海洋大學(xué);2013年

6 邱樹亮;潘那利番茄漸滲系的構(gòu)建及相關(guān)農(nóng)藝性狀的定位[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2012年

7 孟佳麗;黃瓜染色體片段導(dǎo)入系群體的構(gòu)建及果實主要數(shù)量性狀位點的初步定位[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

8 關(guān)成冉;利用近等基因系精細(xì)定位一個水稻抽穗期QTL-qHd3-1[D];揚州大學(xué);2011年

9 李學(xué)峰;野生黃瓜代換系的構(gòu)建[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2010年

10 程周超;黃瓜SSR遺傳圖譜的構(gòu)建及黃瓜重要農(nóng)藝性狀的QTL定位[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2010年

本文編號：2800499