【摘要】：谷氨酸脫羧酶(glutamate decarboxylase,GAD)是生物體內(nèi)普遍存在的一類胞內(nèi)酶,主要分布于細(xì)胞質(zhì)中,是催化谷氨酸脫羧反應(yīng)的關(guān)鍵限速酶,產(chǎn)物γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)具有調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)發(fā)育、抵抗非生物脅迫等功能。本研究以小白菜‘五月慢’(Brassica campestris ssp.chinensis)為材料,采用同源序列法克隆了小白菜谷氨酸脫羧酶基因(glutamic acid decarboxylase gene,GAD)(Gen Bank登錄號(hào)為KP852557);采用浸種和外源添加處理,檢測(cè)了高氮水平下外源GABA對(duì)小白菜生長(zhǎng)、GAD基因和酶蛋白表達(dá)及酶活性的影響。結(jié)果表明,小白菜GAD含有一個(gè)長(zhǎng)為1 485 bp的開(kāi)放閱讀框,編碼494個(gè)氨基酸,蛋白保守結(jié)構(gòu)域包含一個(gè)磷酸吡哆醛依賴的谷草轉(zhuǎn)氨酶超家族;小白菜GAD基因編碼的氨基酸序列與大白菜(B.rapa)GAD2基因氨基酸序列的一致性達(dá)到100%,與甘藍(lán)型油菜(B.napus)、蘿卜(Raphanus sativus)和芥菜(B.juncea)的GAD2基因氨基酸序列親緣關(guān)系較近,序列一致性分別為99%、99%和98%。外源GABA添加和浸種均提高了高氮水平下小白菜的生長(zhǎng)以及葉片GAD基因轉(zhuǎn)錄水平、GAD蛋白表達(dá)量和GAD酶的活性,但GABA處理間存在著明顯的濃度差異,其中3.75~6.25 mmol/L GABA浸種與2.5~3.75 mmol/L添加處理效果較明顯(P0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果初步證實(shí)了小白菜的生長(zhǎng)、GAD基因、蛋白和活性受GABA施用濃度和施用方式的影響,且與根際環(huán)境氮素水平密切相關(guān)。該研究為進(jìn)一步利用Bc GAD基因和GABA調(diào)控方法提高葉菜類蔬菜品質(zhì)提供理論依據(jù)。

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 胡偉;楊曉穎;李美英;王卓;徐碧玉;金志強(qiáng);;香蕉谷氨酸脫羧酶基因克隆與表達(dá)[J];西北植物學(xué)報(bào);2009年03期

2 戴鳳燕;繆冶煉;陳介余;米朕;;香蕉成熟過(guò)程中谷氨酸脫羧酶活力的變化規(guī)律[J];中國(guó)食品學(xué)報(bào);2010年06期

本文編號(hào)：2749228