【摘要】：桃屬于薔薇科李屬植物,是我國重要的經(jīng)濟果樹。由于桃易腐爛、不耐貯藏,年供應期較短。選育不同成熟期的品種可有效延長桃果實的年供應期。因此果實成熟期是桃的重要經(jīng)濟性狀也是育種的重要目標之一,鑒定并研究桃果實成熟期相關基因可為今后的轉基因育種工作提供優(yōu)良的基因資源,同時對桃分子標記輔助育種工作的開展也具有重要意義。(1)本文以199份桃種質資源為試材驗證前人針對單個雜交群體開發(fā)的11個與桃果實成熟有關的分子標記,其中NAC72-Indel標記可以較好地區(qū)分出極早熟和晚熟品種。這表明該位點可能含有調控桃果實成熟期的重要基因。(2)通過分析桃NAC72-Indel位點基因組序列,發(fā)現(xiàn)PpNAC72與PpNAC56串聯(lián)在一起,基因間隔19,863 bp。同時,分析發(fā)現(xiàn)番茄和甜瓜中與果實成熟有關的位點,NOR和ETHQV6.3,也存在兩個NAC基因串聯(lián)在一起的現(xiàn)象,且兩個NAC基因分別與PpNAC72和PpNAC56高度同源。這表明桃PpNAC56和PpNAC72基因串聯(lián)現(xiàn)象在果實成熟調控中可能扮演了非常重要的角色。(3)克隆并測序桃PpNAC72、PpNAC56基因的編碼區(qū)序列,序列比對分析發(fā)現(xiàn)PpNAC56與桃參考基因組序列之間無差異;PpNAC72存在兩種轉錄本,與參考序列相比,其中一種轉錄本(PpNAC72m)含一個9 bp插入。對PpNAC72和PpNAC56基因qRT-PCR分析發(fā)現(xiàn),PpNAC72基因的轉錄水平在果實成熟前期都出現(xiàn)一個轉錄高峰,隨后轉錄水平平緩下降;而PpNAC56基因在三個品種整個果實成熟過程中表現(xiàn)出較高的轉錄水平。這意味PpNAC72可能直接參與果實的成熟期調控。(4)利用酵母雙雜交系統(tǒng),分析了PpNAC56、PpNAC72和PpNAC72m的轉錄激活活性以及彼此之間是否存在蛋白互作。結果表明三個NAC蛋白都具有轉錄激活活性,因此在進行蛋白互作試驗之前,需分析NAC56/72的轉錄激活域。然后,檢測桃NAC72和NAC56基因之間有無互作還需進一步試驗驗證。(5)利用番茄遺傳轉化體系,觀察‘A57’品種CK的下胚軸和子葉分化情況發(fā)現(xiàn)其下胚軸的分化能力高于子葉。雖然未得到轉基因株系,但為進一步研究PpNAC72和PpNAC56基因的功能奠定了基礎。
【圖文】：

圖 2-2 部分桃材料的基因組 DNAFig.2-2 Genomic DNA extracted from peach leaves記的驗證查閱，我們共選取了 11 對與成熟相關的分子標記（表 2-2）在 19

圖 2-3 多對引物在部分品種中的擴增情況 The amplification of Several pairs primer in part peach germplasm with different maturity dates2-Indel 標記在 199 份不同成熟期品種中的擴增Indel 標記在極早熟（編號 1-13）、晚熟和極晚熟（編號 13-54）種質資源中擴
【學位授予單位】：河南農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S662.1

【參考文獻】

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1 宋立琴;張立彬;張吉軍;于鳳鳴;肖嘯;;桃果實成熟期主效基因的SSR標記定位[J];農業(yè)生物技術學報;2012年06期

2 田波濤;李景富;許向陽;;番茄不成熟基因nor的AFLP分子標記研究進展[J];中國瓜菜;2009年03期

3 韓明玉;趙彩平;田玉命;;桃雜種后代果實成熟期遺傳趨向的分析研究[J];西北農林科技大學學報(自然科學版);2008年12期

4 ;Simple Sequence Repeat Analysis of Genetic Diversity in Primary Core Collection of Peach(Prunus persica)[J];Journal of Integrative Plant Biology;2008年01期

5 張進獻;李冬杰;李宏杰;;果實軟化過程中細胞壁結構和組分及細胞壁酶的變化[J];河北林果研究;2007年02期

6 張嵩,張光倫,曾秀麗;纖維素酶和多聚半乳糖醛酸酶與果實成熟[J];果樹學報;2005年05期

7 阮英,生吉萍,劉開朗,申琳;番茄采后成熟過程種子和果皮中脫落酸與乙烯代謝的關系[J];中國農業(yè)大學學報;2005年05期

8 段紅喜,張志華;我國核桃生產(chǎn)概況、問題及發(fā)展途徑[J];果農之友;2004年01期

9 寇曉虹;朱本忠;田慧琴;石英;羅云波;;多聚半乳糖醛酸酶(PG)反義基因對加工番茄果實成熟的影響[J];中國食品學報;2003年04期

10 龔亞明,毛偉華;果實成熟分子生理的研究進展[J];浙江農業(yè)學報;2002年04期

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1 賈美茹;FERLs/SnRK2s蛋白激酶參與果實成熟調控的信號轉導機理研究[D];中國農業(yè)大學;2017年

2 周明;西瓜果實成熟乙烯調控的生理及分子機制初探[D];中國農業(yè)科學院;2017年

3 朱明庫;番茄SlNAC4和SlDEAD31基因在果實成熟及非生物脅迫響應中的功能研究[D];重慶大學;2015年

4 韓明玉;桃主要性狀遺傳分析與再生體系的建立[D];西北農林科技大學;2009年

5 俞明亮;桃性狀遺傳評價和分子標記技術研究[D];南京農業(yè)大學;2004年

6 顧采琴;Ca～(2+)、CaM及其目標酶與乙烯誘導番茄和草莓果實成熟衰老關系的研究[D];浙江大學;2003年

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1 葉玉平;細胞壁多糖降解引起采后菠蘿果實成熟軟化機理的初步研究[D];廣東海洋大學;2014年

2 宋立琴;桃果實成熟期基因的SSR標記與定位[D];河北科技師范學院;2010年

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本文編號：2652376