發(fā)布時(shí)間：2020-03-28 18:06

【摘要】：目的應(yīng)用β-1,3-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶2(B3galt2)基因敲除小鼠研究該基因?qū)W(xué)習(xí)記憶及海馬內(nèi)神經(jīng)元、突觸可塑性的影響,從而進(jìn)一步闡明B3galt2在學(xué)習(xí)記憶和海馬內(nèi)神經(jīng)元及突觸可塑性調(diào)控中的重要作用,為進(jìn)一步研究B3galt2及其它糖基轉(zhuǎn)移酶在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中作用提供理論依據(jù)。方法應(yīng)用β-1,3-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶2基因敲除小鼠繁育及基因型鑒定的方法,獲得來(lái)自同一窩、相同性別的6個(gè)月野生型、雜合子和純合子小鼠,采用水迷宮方法檢測(cè)動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶功能,應(yīng)用β-半乳糖苷酶染色方法驗(yàn)證B3galt2基因在海馬內(nèi)的表達(dá)方式,應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色法觀察海馬內(nèi)神經(jīng)元及突觸的變化。結(jié)果1、通過繁育β-1,3-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶2基因敲除小鼠,成功獲得來(lái)自同一窩及相同性別的6個(gè)月野生型、雜合子和純合子小鼠。2、β-1,3-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶2基因敲除影響小鼠的學(xué)習(xí)和記憶功能。3、β-1,3-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶2在小鼠海馬內(nèi)表達(dá)。4、β-1,3-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶2基因敲除降低海馬內(nèi)神經(jīng)元的數(shù)目及突觸相關(guān)性蛋白SNAP25和樹突標(biāo)記性蛋白MAP2的表達(dá)水平。結(jié)論1、β-1,3-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶2基因在6個(gè)月小鼠海馬中明顯表達(dá)。2、β-1,3-半乳糖基轉(zhuǎn)移酶2參與小鼠學(xué)習(xí)記憶功能及海馬內(nèi)神經(jīng)元和突觸的調(diào)控。
【圖文】：

實(shí)驗(yàn)結(jié)果一、基因型鑒定結(jié)果采用PCR方法、應(yīng)用小鼠鼠尾組織中基因組DNA對(duì)小鼠的基因型進(jìn)行鑒定，圖 1 為 PCR 結(jié)果舉例。該實(shí)驗(yàn)選用來(lái)自同一窩、相同性別的 6 個(gè)月的野生型、雜合子和純合子小鼠完成除了β-半乳糖苷酶染色以外的實(shí)驗(yàn)，選用來(lái)自同一窩、相同性別的 6 個(gè)月的野生型和雜合子完成β-半乳糖苷酶染色實(shí)驗(yàn)。

14圖2 小鼠Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果A:各小鼠連續(xù)5天測(cè)試訓(xùn)練期間游泳距離；B:各小鼠連續(xù)5天測(cè)試訓(xùn)練期間平均游泳速度；C: 各小鼠連續(xù)5天測(cè)試訓(xùn)練期間通過各個(gè)象限的次數(shù)；D:撤掉平臺(tái)的探索訓(xùn)練中野生型、雜合子、純合子小鼠游泳軌跡圖。三、β-半乳糖苷酶染色結(jié)果為了驗(yàn)證B3galt2基因在6個(gè)月小鼠腦內(nèi)的表達(dá)，，我們用6個(gè)月的B3galt2雜合子小鼠腦組織做了x-gal染色。同時(shí)，用6個(gè)月的野生型小鼠做相同顏色，作為陰性對(duì)照。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，B3galt2雜合子小鼠腦中海馬及皮層β-半乳糖苷酶染色陽(yáng)性，在海馬內(nèi)DG、CA1區(qū)域中β-半乳糖苷酶表達(dá)明顯（見圖3）。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示6個(gè)月小鼠海馬內(nèi)的DG、CA1區(qū)域表達(dá)B3galt2。
【學(xué)位授予單位】：錦州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：Q42

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 Hui Wang;Rui-Yun Peng;;Basic roles of key molecules connected with NMDAR signaling pathway on regulating learning and memory and synaptic plasticity[J];Military Medical Research;2016年04期

本文編號(hào)：2604724