發(fā)布時(shí)間：2020-03-18 21:12

【摘要】：紫花苜蓿(Medicago sativa L.)作為世界上栽培歷史最悠久、種植面積最大、利用價(jià)值最高的優(yōu)質(zhì)豆科牧草,其產(chǎn)業(yè)化日漸興起。伴隨著農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)生產(chǎn)模式的轉(zhuǎn)變,除草劑得到了大面積的推廣和使用,紫花苜蓿苗期長(zhǎng),植株生長(zhǎng)緩慢,造成雜草迅速蔓延,阻礙紫花苜蓿幼苗生長(zhǎng)及發(fā)育,嚴(yán)重影響其產(chǎn)量和質(zhì)量。隨著轉(zhuǎn)基因作物時(shí)代的到來,抗除草劑轉(zhuǎn)基因作物也成為一種普遍的種植要求。自從1986年的首例紫花苜蓿轉(zhuǎn)基因成功以來,紫花苜蓿遺傳轉(zhuǎn)化的研究已取得一定的進(jìn)展。但現(xiàn)有的紫花苜蓿遺傳轉(zhuǎn)化體系轉(zhuǎn)化效率很低,限制了優(yōu)良外源基因?qū)ψ匣ㄜ俎５霓D(zhuǎn)化,降低了轉(zhuǎn)基因紫花苜蓿新品種的選育速度。本試驗(yàn)以紫花苜蓿組培苗葉片為外植體,應(yīng)用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法,成功將CP4EPSPS基因轉(zhuǎn)到受體中。在試驗(yàn)過程中,優(yōu)化了影響遺傳轉(zhuǎn)化的因素,包括草銨膦篩選濃度(2mg/L)、共培養(yǎng)時(shí)間(3d)、農(nóng)桿菌侵染濃度(OD_(600)=0.8)、農(nóng)桿菌種類(LBA105)、草甘膦噴施濃度(1%)等。試驗(yàn)獲得73株抗性植株,PCR檢測(cè)驗(yàn)證得到24轉(zhuǎn)基因植株,經(jīng)試紙條檢測(cè)和噴施草甘膦最終確定6株為陽性植株。
【圖文】：

圖 2. 不同濃度草銨膦溶液對(duì)愈傷組織的影響Fig.2 Effects of Different Concentrations of Glufosinate on Callus表 3-2 草銨膦抗性濃度篩選結(jié)果(30d)Table 3-2 Effect of Different Concentrations of Glufosinate on Callus Induction草銨膦濃度(mg/L)外植體數(shù)（個(gè)）愈傷組織數(shù) a(個(gè))愈傷組織數(shù) b(個(gè))愈傷組織數(shù) c(個(gè))愈傷誘導(dǎo)率(％)01.01.52.02.5606060606020201430201813401919112098.3395.0063.3315.000.00

圖 3.噴施 1%濃度草甘膦溶液對(duì)紫花苜蓿的影響Fig.3 Effects of Spraying 1% Glyphosate Solution on Alfalfa表 3-3 不同濃度草甘膦溶液對(duì)紫花苜蓿影響結(jié)果Table 3-3 Effect of Different Concentrations of Glyphosate on Callus Inductio草甘膦濃度%植株成活數(shù)（個(gè)） 平均植株成活率10d 30d 10d 30dA 組 B 組 C 組 A 組 B 組 C 組 / /0 20 20 20 20 20 20 100 1000.5 19 19 18 14 16 16 93.33 76.670.7 11 8 9 8 7 7 46.67 36.671 5 3 4 2 3 3 20 13.332 0 0 0 0 0 0 0 0
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S541.9

【參考文獻(xiàn)】

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1 王成龍;周美亮;董雪妮;唐益雄;邵繼榮;吳燕民;;紫花苜蓿兩種再生體系的優(yōu)化及比較[J];中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào);2015年04期

2 武驍;;草甘膦抗性研究進(jìn)展[J];世界農(nóng)藥;2014年05期

3 凌進(jìn);;草銨膦、百草枯、草甘膦對(duì)非耕地雜草的防效比較[J];農(nóng)藥;2014年08期

4 吳文進(jìn);余永志;;不同濃度草銨膦水劑防除非耕地雜草藥效試驗(yàn)初報(bào)[J];中國(guó)園藝文摘;2013年10期

5 周垂帆;李瑩;張曉勇;俞元春;;草甘膦毒性研究進(jìn)展[J];生態(tài)環(huán)境學(xué)報(bào);2013年10期

6 邱龍;馬崇烈;劉博林;章旺根;;耐除草劑轉(zhuǎn)基因作物研究現(xiàn)狀及發(fā)展前景[J];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué);2012年12期

7 趙錦慧;賴穎;郭婕;胡彥民;;不同草甘膦篩選方式對(duì)玉米抗性愈傷組織繼代與分化的影響[J];江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué);2011年04期

8 楊逢玉;倪漢文;張宏軍;;3種滅生性除草劑對(duì)北京主要雜草的防治效果[J];林業(yè)實(shí)用技術(shù);2011年03期

9 李敬娜;劉亞;李翔;袁潛華;趙久然;;抗草甘膦基因表達(dá)載體的構(gòu)建及對(duì)玉米的遺傳轉(zhuǎn)化[J];華北農(nóng)學(xué)報(bào);2010年04期

10 施莉娟;許雷;溫洋;蒲小鵬;;新疆大葉紫花苜蓿兩種再生體系的比較[J];東北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2010年04期

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本文編號(hào)：2589195