【摘要】：牛支原體(Mycoplasma bovis,M.bovis)是一種可感染牛的致病性病原體,可導致牛發(fā)生肺炎、乳房炎、關(guān)節(jié)炎、角膜結(jié)膜炎等多種疾病,常與多種病原體混合感染,難以徹底治愈。為進一步確定新疆地區(qū)牛支原體的感染情況、代表株的基因組成及毒力基因遺傳特性,本研究從哈密、塔城等六個不同地區(qū)的9個規(guī)�；霾杉艘伤婆Ｖгw感染的病死犢牛肺臟組織、關(guān)節(jié)液及鼻拭子41份,開展了牛支原體病原分離與PCR鑒定,分離株可變表面脂蛋白VspE的基因分型和代表株全基因測序分析,為牛支原體病的防治及新型疫苗的研發(fā)提供病原分子流行病學依據(jù)。研究內(nèi)容與結(jié)果如下:1.采用實驗室自主研發(fā)的牛支原體培養(yǎng)基,對采集的41份疑似牛支原體病病料進行病原分離培養(yǎng)及PCR鑒定,結(jié)果從41份樣品中分離獲得24株具有支原體典型菌落的培養(yǎng)物,分離株經(jīng)牛支原體特異性基因oppD/F PCR檢測均為牛支原體,陽性率為58.5%,分離株序列分析顯示24株新疆不同地區(qū)分離株間核苷酸和氨基酸同源性均較高,與國際標準株P(guān)G45(CP002188.1)氨基酸同源性為97.3%~100%,具有高度同源性。研究結(jié)果為新疆地區(qū)牛支原體分子流行病學及免疫預防提供理論依據(jù)。2.對新疆牛支原體代表株XJ1260進行全基因組測序,利用生物信息學軟件進行分析,結(jié)果表明,新疆牛支原體XJ1260株基因組大小為953,064bp,GC含量為29.97%,測序組裝后產(chǎn)生114個scaffolds,基因組組分經(jīng)分析后發(fā)現(xiàn),串聯(lián)重復序列208個,總長為16,559bp,占基因組全長的1.74%,tRNA 90個,rRNA9個,基因組中有與新陳代謝相關(guān)的基因。3.為研究新疆不同地區(qū)牛支原體分離株Vsp基因的遺傳特性,選擇13株新疆不同地區(qū)分離株,根據(jù)GenBank登錄牛支原體PG45的VspE序列(GenBank登錄號:AH008162.2),設計引物,經(jīng)PCR檢測Vsp基因及序列分析。結(jié)果表明13株新疆分離株與標準株P(guān)G45的核苷酸同源性64.1%~95.8%,表明該基因片段在保守區(qū)域內(nèi)。13株新疆不同地區(qū)分離株間核苷酸同源性為62.5%~100%,存在一定變異。
文內(nèi)圖片：
圖片說明： 病原的分離在實驗室自制培養(yǎng)基中盲傳 3~4 代后，從 24 份中得到牛支原體培養(yǎng)物，將培到牛支原體固體培養(yǎng)基上置 37℃ 5%CO2 培養(yǎng)箱中生長 4~5 d，在顯微鏡下可“煎蛋狀”菌落，如圖 2 所示，初步鑒定為牛支原體，分別命名為 XJKT601T601283、XJKT601273、XJKT172、XJKT173 、XJHMN1、XJHMN2、XJSLi-1 等。圖 1 病理解剖變化（黃白壞死灶；粘連）Fig 1 The changes of PathologicalAnatomy(Yellow and white necrosis;adhesion)
文內(nèi)圖片：
圖片說明： 基中盲傳 3~4 代后，從 24 份中得到牛養(yǎng)基上置 37℃ 5%CO2 培養(yǎng)箱中生長 4如圖 2 所示，初步鑒定為牛支原體，，分1273、XJKT172、XJKT173 、XJHMN圖 1 病理解剖變化（黃白壞死灶；粘連）ges of PathologicalAnatomy(Yellow and white
【學位授予單位】：石河子大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：S858.23

【參考文獻】

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本文編號：2513713