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農(nóng)桿菌介導(dǎo)bar基因轉(zhuǎn)化水稻胚性愈傷組織的研究

發(fā)布時間:2019-07-08 14:34
【摘要】:為建立以草丁膦為選擇標記的農(nóng)桿菌Agrobacterium tumefaciens介導(dǎo)的水稻Oryza sativa胚性愈傷組織轉(zhuǎn)化體系,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將bar基因?qū)肓恕毡厩纭疧ryza sativa‘Nipponbare’‘秀水134’‘Xiushui 134’和‘中花11’‘Zhonghua 11’等3個水稻品種的胚性愈傷組織。在分別以選擇壓15.0,10.0和10.0 mg·L~(-1)的草丁膦質(zhì)量濃度進行了3次選擇后,聚合酶鏈式反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)發(fā)現(xiàn)‘日本晴’‘秀水134’和‘中花11’的愈傷組織轉(zhuǎn)化效率分別是77.9%,67.5%和92.2%,獲得的抗性愈傷組織可以進一步分化成苗。它們的分化率依次是76.1%,44.4%和86.7%;成苗率分別為65.6%,66.7%和30.7%。在以草丁膦作為篩選標記時,首選‘日本晴’作為轉(zhuǎn)化受體進行遺傳轉(zhuǎn)化。該體系為以抗除草劑基因作為篩選標記的水稻遺傳轉(zhuǎn)化和基因功能驗證提供了技術(shù)基礎(chǔ),獲得的抗草丁膦轉(zhuǎn)化植株為水稻育種提供了材料。
[Abstract]:In order to establish an Agrobacterium-mediated transformation system of rice Oryza sativa, which was mediated by Agrobacterium tumefaciens, the bar gene was introduced into the embryonic callus of three rice varieties, such as" Yuza sativa, Nippon ", Xiushui 134 ', Xiusui 134', and 11 '-Zhonghua 11'. The transformation efficiency of callus was 77.9%, 67.5% and 92.2%, respectively. The yield of the resistant calli was 76.1%, 44.4% and 86.7%, respectively, and the rate of emergence was 65.6%, 66.7% and 30.7%, respectively. The invention provides a technical basis for the genetic transformation of the rice and the verification of the gene function by using the anti-herbicide gene as a screening marker, and is provided with a material for rice breeding.
【作者單位】: 浙江農(nóng)林大學農(nóng)業(yè)與食品科學學院浙江省農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)改良技術(shù)研究重點實驗室;
【基金】:國家自然科學基金青年基金資助項目(31401461) 浙江省大學生科技創(chuàng)新活動計劃(新苗人才計劃)項目(2015R412002) 2015年浙江農(nóng)林大學農(nóng)學院大學生創(chuàng)新訓(xùn)練計劃項目
【分類號】:S511

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本文編號:2511657

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