【摘要】：以茶樹(Camellia sinensis(L.))品種龍井43為試材,采用PCR結(jié)合RACE技術(shù),克隆得到硝態(tài)氮轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因(NRT1.1)的c DNA全長(zhǎng)序列,基因序列全長(zhǎng)1 880 bp,其中開放閱讀框(ORF)1 788 bp,編碼595個(gè)氨基酸,預(yù)測(cè)蛋白質(zhì)分子量為65.9 k D,理論等電點(diǎn)為8.99,命名為Cs NRT1.1。序列分析表明,Cs NRT1.1與葡萄NRT1.1氨基酸序列的相似性最高。通過(guò)生物信息學(xué)分析,對(duì)Cs NRT1.1的氨基酸理化性質(zhì)、親/疏水性、跨膜區(qū)域及亞細(xì)胞定位進(jìn)行了預(yù)測(cè)。實(shí)時(shí)定量PCR表達(dá)分析表明,茶樹根和葉片中Cs NRT1.1在1 mol·L~(-1) NO3-處理5 min內(nèi)均受到抑制,葉部Cs NRT1.1表達(dá)量0.5 h后即達(dá)到最大值,24 h內(nèi)各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均高于根部,根中表達(dá)量Cs NRT1.1始終低于對(duì)照。本研究結(jié)果為研究茶樹對(duì)NO3-的吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)和調(diào)控機(jī)理提供了分子生物學(xué)基礎(chǔ)。
[Abstract]:With tea tree (Camellia sinensis (L.) Variety Longjing 43 was used to clone the full-length c DNA sequence of nitrate nitrogen transporter gene (NRT1.1) by PCR combined with RACE. The full length of the gene sequence was 1880 bp,. The open reading frame (ORF) 1788 bp, encodes 595 amino acids. The predicted molecular weight of the protein is 65.9 KD, and the theoretical isoelectric point is 8.99, named Cs NRT1.1.. Sequence analysis showed that the similarity between Cs NRT1.1 and grape NRT1.1 amino acid sequence was the highest. The physical and chemical properties, hydrophilicity, transmembrane region and subcellular localization of Cs NRT1.1 were predicted by bioinformatics analysis. Real-time quantitative PCR expression analysis showed that Cs NRT1.1 in tea roots and leaves was inhibited within 5 min treated with 1 mol 路L ~ (- 1) NO3-, and the expression of Cs NRT1.1 in leaves reached the maximum value after 0.5 h. The expression of Cs NRT1.1 in roots was higher than that in roots at all time points within 24 hours, and the expression of in roots was always lower than that in the control. The results of this study provide a molecular biological basis for the study of the mechanism of absorption, transport and regulation of NO3- by tea plants.
【作者單位】： 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝研究所江蘇省高效園藝作物遺傳改良重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所農(nóng)業(yè)部茶樹生物學(xué)與資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;南京農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院作物遺傳與種質(zhì)創(chuàng)新國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31400587) 江蘇省自然科學(xué)基金(BK20160590) 茶樹生物學(xué)與資源利用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放基金(SKLTOF20150114) 江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金(CX(16)1003)
【分類號(hào)】：S571.1

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3 本報(bào)記者 劉e，

本文編號(hào)：2493677