【摘要】：【目的】本研究是從前期獲得的100余份轉基因抗除草劑草甘膦玉米品系中,挑選T抗-1等14個轉基因玉米品系進行拷貝數(shù)檢測�！痉椒ā坎捎靡环N新型的拷貝數(shù)分析方法——微滴數(shù)字PCR技術(droplet digital PCR,簡稱dd PCR),設計特異引物對外源抗草甘膦基因2m G2-epsps進行絕對定量分析�！窘Y果】供試的14份轉基因材料中10份是單拷貝品系。同時,通過引物探針特異性試驗、葉片基因組DNA的PCR抑制和濃度檢測、轉基因玉米的外源基因2m G2-epsps的實時PCR檢測和基因組DNA的酶切等系列研究,建立穩(wěn)定的轉基因玉米拷貝數(shù)分析的dd PCR檢測體系。【結論】微滴數(shù)字PCR技術為這批轉基因玉米的下一步轉基因生物安全評價提供了重要參數(shù),同時建立了轉基因玉米(genetically modified maize)外源基因拷貝數(shù)dd PCR分析方法。
[Abstract]:[objective] in this study, more than 100 transgenic herbicide-resistant glyphosate-resistant maize lines were obtained. Fourteen transgenic maize lines, such as T-resistance-1, were selected for copy number detection. [methods] A new copy number analysis method, microdrop digital PCR technique (droplet digital PCR,), was used to detect copy number of transgenic maize lines (dd PCR), for short). Specific primers were designed for absolute quantitative analysis of exogenous glyphosate resistance gene 2m G2-epsps. [results] of the 14 transgenic materials tested, 10 were single copy lines. At the same time, PCR inhibition and concentration detection of genomic DNA in leaves, real-time PCR detection of exogenous gene 2m G2-epsps and restriction enzyme digestion of genomic DNA in transgenic maize were carried out by primer probe specificity test. A stable dd PCR detection system for copy number analysis of transgenic maize was established. [conclusion] the microdrop digital PCR technique provides important parameters for the next step of transgenic biological safety assessment of these transgenic maize. At the same time, the dd PCR analysis method of foreign gene copy number of transgenic maize (genetically modified maize) was established.
【作者單位】： 四川省農業(yè)科學院生物技術核技術研究所;中國農業(yè)科學院生物技術研究所;
【基金】：四川省農科院高新技術研究應用專項(2016GXTZ-001);四川省農科院財政基因工程項目(2016ZYPZ-003) 轉基因生物新品種培育重大專項(2014ZX0800301B)
【分類號】：S513

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 ;美發(fā)現(xiàn)轉基因玉米產生的毒物可滲入土壤[J];世界熱帶農業(yè)信息;2000年02期

2 黎裕,王天宇,石云素;轉基因玉米的研究現(xiàn)狀與未來[J];玉米科學;2000年04期

3 毛磊;;轉基因玉米產生的毒物可滲入土壤[J];農藥市場信息;2000年02期

4 ;美最新研究懷疑轉基因玉米抗害蟲的能力[J];世界科技研究與發(fā)展;2001年05期

5 汪重;;美發(fā)現(xiàn)轉基因玉米產生的毒物可滲入土壤[J];農藥市場信息;2001年04期

6 ;法美科學家為轉基因玉米“平反”[J];種子世界;2002年05期

7 馮俊揚;;墨西哥野生玉米受到轉基因玉米威脅[J];農藥市場信息;2002年13期

8 程焉平;轉基因玉米的研究與應用[J];黑龍江農業(yè)科學;2003年01期

9 王慶祥,呂桂蘭;轉基因玉米研究現(xiàn)狀及其產業(yè)化發(fā)展對策[J];沈陽農業(yè)大學學報;2003年03期

10 陳穎,徐寶梁,蘇寧,葛毅強,王曙光;實時熒光定量PCR技術在轉基因玉米檢測中的應用研究[J];作物學報;2004年06期

相關會議論文 前7條

1 王悅冰;郎志宏;黃大f ;;利用瞬時表達體系檢測不同內含子在轉基因玉米中的增強效應[A];中國農業(yè)生物技術學會第三屆會員代表大會暨學術交流會論文摘要集[C];2006年

2 張士龍;賀正華;黃益勤;;抗蟲、耐漬轉基因玉米種質的創(chuàng)制[A];2012年全國玉米遺傳育種學術研討會暨新品種展示觀摩會論文及摘要集[C];2012年

3 曹修嶺;路銀貴;邸墊平;張志燕;劉賀;田蘭芝;張愛紅;張艷敬;石林丹;徐進;段西飛;韓成貴;苗洪芹;李大偉;于嘉林;;rnc70基因介導的高抗RBSDV轉基因玉米新品系的創(chuàng)制[A];中國植物病理學會2012年學術年會論文集[C];2012年

4 陳威;王坤;王學永;劉麗;番興明;;高賴氨酸轉基因玉米的鑒定和檢測[A];2012年全國玉米遺傳育種學術研討會暨新品種展示觀摩會論文及摘要集[C];2012年

5 張紅偉;張紅梅;鄭祖平;陳剛;王國英;譚振波;;Bt轉基因玉米的獲得及其對玉米螟的抗性分析[A];2003年全國作物遺傳育種學術研討會論文集[C];2003年

6 張紅偉;譚振波;劉欣潔;楊華;;Bt轉基因玉米株系T123抗螟性和主要農藝性狀的鑒定分析[A];2004全國玉米種質擴增、改良、創(chuàng)新與分子育種學術會議論文集[C];2004年

7 張紅偉;劉欣潔;譚振波;;Bt轉基因玉米株系T123的培育及其抗螟性和農藝性狀的鑒定分析[A];科技、工程與經濟社會協(xié)調發(fā)展——中國科協(xié)第五屆青年學術年會論文集[C];2004年

相關重要報紙文章 前10條

1 胡軍華;孟山都：轉基因玉米影響生育缺乏依據(jù)[N];第一財經日報;2008年

2 記者 李禾;轉基因玉米可能影響生物繁殖[N];科技日報;2008年

3 李學梅;法國否決轉基因玉米種植[N];中國食品報;2009年

4 記者 李學梅;法權威機構認定轉基因玉米“弊大于利”[N];新華每日電訊;2009年

5 李鵬;南非轉基因玉米大獲豐收 缺糧鄰國顧慮安全拒進口[N];中國食品報;2010年

6 記者 黃涵;法國權威機構否定轉基因玉米致癌論[N];新華每日電訊;2012年

7 王寰鷹 黃涵;轉基因玉米毒性研究存在不足[N];糧油市場報;2012年

8 夏妍;我國首次批準進口阿根廷轉基因玉米[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2013年

9 ;我國育成高營養(yǎng)含量的轉基因玉米[N];今日信息報;2004年

10 本版編輯邋張之簡 徐超;法國決定暫停種植轉基因玉米[N];新華每日電訊;2008年

相關博士學位論文 前7條

1 路興波;轉基因玉米環(huán)境安全性及其產品成分檢測技術[D];山東農業(yè)大學;2006年

2 赫福霞;抗蟲/耐草甘膦多價轉基因玉米的研究[D];東北農業(yè)大學;2008年

3 王柏鳳;轉基因玉米對跳蟲的影響[D];中國科學院研究生院（東北地理與農業(yè)生態(tài)研究所）;2014年

4 馬金霞;非編碼基因zm401對玉米小孢子發(fā)育的影響[D];中國農業(yè)大學;2005年

5 李京;新型轉基因抗草甘膦玉米的培育及轉基因玉米安全控制技術的研究[D];浙江大學;2013年

6 孫鶴;連接肽2A和LP4/2A在玉米中的剪切分析及抗蟲耐除草劑轉基因玉米的獲得[D];中國農業(yè)科學院;2012年

7 白云鳳;利用不同策略獲得抗SCMV轉基因玉米的研究[D];中國農業(yè)大學;2005年

相關碩士學位論文 前10條

1 楊文霞;赤霉菌Gibberella sp.F75來源的α-半乳糖苷酶轉基因玉米的培育[D];中國農業(yè)科學院;2015年

2 任珍靜;轉mAM79基因玉米的獲得及草甘膦抗性分析[D];中國農業(yè)科學院;2015年

3 王兆明;轉基因玉米檢測的內參基因篩選與鑒定[D];安徽農業(yè)大學;2014年

4 楊麗麗;Bt-mCry1Ac基因在抗蟲轉基因玉米中的表達及其對斑馬魚毒性效應的初步研究[D];安徽農業(yè)大學;2014年

5 王江;兩種代表性生物對轉基因玉米響應的生物學特性研究[D];哈爾濱師范大學;2016年

6 王清華;轉基因玉米BT11和T-25品系環(huán)介導等溫擴增（LAMP）檢測方法的建立[D];大連工業(yè)大學;2014年

7 趙思楠;轉基因玉米“雙抗12-6”草甘膦耐受性、生存競爭力及其對雜草多樣性影響的研究[D];浙江大學;2016年

8 劉凱;轉基因玉米對土壤微生物的影響[D];山西大學;2016年

9 宋紅霞;抗草甘膦轉基因玉米的研究[D];山西大學;2016年

10 連慶;我國轉基因玉米產業(yè)化面臨的主要問題及對策[D];對外經濟貿易大學;2016年

，

本文編號：2470744