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瓜葉菊‘大花’Mlo基因RNAi載體的構建及其遺傳轉化研究

發(fā)布時間:2019-03-24 16:06
【摘要】:為進一步研究瓜葉菊Mlo基因的功能以及為將來獲得具有廣譜與持久的白粉菌抗性瓜葉菊種質資源奠定基礎,以瓜葉菊(Pericallis hybrida B.Nord)‘大花’為試驗材料,克隆瓜葉菊‘大花’Mlo基因保守片段,構建了瓜葉菊‘大花’RNAi載體;同時構建了瓜葉菊‘大花’高頻再生體系;并利用根癌農桿菌介導法轉化瓜葉菊‘大花’進而建立了遺傳轉化體系。經酶切鑒定,成功構建了Mlo基因的RNAi載體質粒pTCK303-mlo-RNAi,構建了瓜葉菊‘大花’高頻再生體系,最終確定瓜葉菊‘大花’最佳愈傷誘導培養(yǎng)基為:MS+6-BA 2.4mg/L+NAA 1.0mg/L+KT 0.3mg/L+2,4-D 1.0mg/L;瓜葉菊‘大花’愈傷組織的分化培養(yǎng)最適培養(yǎng)基為:MS+6-BA 2.0mg/L+NAA0.1mg/L;瓜葉菊‘大花’生根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 0.5mg·L-1,并且初步探索了瓜葉菊‘大花’Mlo基因轉化體系。
[Abstract]:In order to further study the function of the Mlo gene and to lay a foundation for the future to obtain a broad-spectrum and long-lasting powdery mildew-resistant melon-leaf chrysanthemum germplasm resource, the method comprises the following steps of: A large-flower 'RNAi vector is constructed, and the high-frequency regeneration system of the large-flower's-flower' is constructed, and the genetic transformation system is further established by using the agrobacterium-mediated transformation of the root cancer. The best callus induction medium was MS + 6-BA 2.4 mg/ L + NAA 1.0 mg/ L + KT 0.3 mg/ L + 2,4-D 1.0 mg/ L, and the optimum medium for callus differentiation and culture was as follows: MS + 6-BA 2.4 mg/ L + NAA 1.0 mg/ L + KT 0.3 mg/ L + 2,4-D 1.0 mg/ L. MS + 6-BA 2.0 mg/ L + NAA0.1 mg/ L; the best culture medium for rooting culture of the large-flower 'flower' of the melon leaves is 1/ 2MS + NAA 0.5 mg 路 L-1, and the transformation system of the large-flower 'Mlo gene of the flower of the melon leaves is preliminarily explored.
【作者單位】: 東北農業(yè)大學園藝學院;
【基金】:黑龍江省自然科學基金項目(C201112)
【分類號】:S682.11

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