【摘要】：本論文對采集于多個(gè)地區(qū)的樣品進(jìn)行耐鹽藻篩選,然后針對耐鹽藻的抗菌活性和抗氧化活性展開實(shí)驗(yàn)研究,取得的結(jié)果如下:1、篩選得到了耐1%、3%鹽度的40株耐鹽藻和耐8%鹽度的四株耐鹽藻并且完成了保種工作,豐富了實(shí)驗(yàn)室耐鹽微藻藻種資源。同時(shí),測定了 4-9號耐鹽藻株分別在0%和3%鹽度下的生長曲線,確定了不同耐鹽藻的相對適宜生長鹽度,并進(jìn)行了分子生物學(xué)鑒定。此外,測定了耐受8%鹽度的四株耐鹽藻的生長曲線,且鑒定這四株藻均為杜氏藻,同時(shí)基于ITS序列分析構(gòu)建了它們之間的系統(tǒng)發(fā)育樹。2、對耐鹽藻(編號1-16)進(jìn)行抑菌活性研究。其中,9號藻株的乙醇提取物對E.coli CMCC 44102和Staphylococcusaureus抑菌活性最高(抑菌圈直徑分別為14.0 mm和12.0 mm) ; 16號藻株的乙醇提取物對Fusarium moniliforme 、 Alternaria alternata、 Ascosphaera apis的相對抑制率最高(分別為7.84%、14.81%、14.52%),11號藻株的乙醇提取物對Fusarfum tricinctum的相對抑制率最高(10.64%)。選取抑菌活性相對較好的藻株進(jìn)行脂肪酸分析,發(fā)現(xiàn)藻株中不飽和脂肪酸種類占比主要集中在亞油酸、亞麻酸和十六碳(二)烯酸。3、對耐鹽藻進(jìn)行抗氧化活性研究,分別測定了總酚、總黃酮及DPPH、ABTS自由基清除活性。結(jié)果顯示,16號藻株的甲醇提取物總酚含量最高(8.74 mg GAE·(g d.wt)-1 ),乙醇提取物總黃酮含量最高(19.22 mg QE·(g d.wt)-1) ; 10號藻株甲醇提取物具有最高的DPPH自由基清除活性(78.23%),16號藻株的甲醇提取物具有最高的ABTS自由基清除活性(93.84%)。此外,本論文成功構(gòu)建了可降解藻毒素的基因工程藻株6803-A+,并研究其藻毒素降解活性,得到的結(jié)果為:1、基因工程藻株6803-A+的培養(yǎng)基中未檢測到MlrA酶活性,但是在其細(xì)胞裂解液中檢測到了 MlrA酶活性(0.108 U·L-1);超聲次數(shù)對藻株6803-A+裂解液MlrA酶活有很大影響,超聲次數(shù)越多,細(xì)胞裂解越充分,當(dāng)超聲15次時(shí)MlrA酶活性最高(0.149U·mL-1),是超聲3次時(shí)酶活性的24.83倍。2、培養(yǎng)菌株至OD=1,測定得到基因工程藻株6803-A+的最大MlrA酶活性為0.108 U·mL-1,基因工程菌株BL21(DE3)-pGEX-mlrA的最大MlrA酶活性為2.985 U.mL-1,后者是前者的27.64倍;培養(yǎng)菌株至OD=2,對菌株Sphingomonas sp. ACM 3962和6803-A+進(jìn)行活細(xì)胞降解實(shí)驗(yàn)研究,其MlrA酶活性分別為0.366 mU.mL-1、0.016 mU.mL-1�；蚬こ淘逯�6803-A+的MlrA酶活性整體不高,這可能與啟動子強(qiáng)度、前導(dǎo)肽基因有關(guān),但該研究確實(shí)證實(shí)了該方案是可行的,開拓了藻毒素基因工程降解新的研究領(lǐng)域。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：北京化工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：Q949.2

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本文編號：2425930