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黃鱔ghrelin基因的克隆及分子特征分析

發(fā)布時間:2018-11-22 20:30
【摘要】:Ghrelin是聯(lián)系生殖和能量代謝的重要橋梁信號分子,通過克隆黃鱔(Monopterus albus)的ghrelin基因并對其基因結構和功能進行了初步分析;運用c DNA末端快速擴增技術獲得了黃鱔ghrelin基因的c DNA序列和DNA序列全長。結果表明,黃鱔ghrelin基因c DNA全長552 bp(Gen Bank accession no.JX122807),包括115 bp的5'端非編碼區(qū)、324 bp的完整開放閱讀框以及113 bp的3'端非編碼區(qū);DNA序列全長1323 bp,由3個內含子和4個外顯子構成,內含子剪切位點具有典型識別核苷酸GT/AG,3個內含子分別為594 bp、84 bp和93 bp,4個外顯子長度分別為229 bp、78 bp、112 bp和133 bp。氨基酸序列分析顯示,ghrelin基因推導的Ghrelin蛋白前體原(propreghrelin)序列由26 aa的信號肽、19 aa的成熟肽以及C端氨基酸殘基等構成;其中,成熟肽第3位為絲氨酸(Ser3),是Ghrelin的酰基化位點;C端氨基酸殘基序列極可能包括與Ghrelin成熟肽功能相互拮抗的肥胖抑制素(Obestatin)。氨基酸的同源性及進化關系分析表明,黃鱔與某些鱸形目魚類的蛋白前體原存在高度相似性,且在進化上黃鱔與較高級的鱸形目、鰈形目魚類聚為一支。ghrelin基因結構及其蛋白質某些氨基酸殘基序列的高度保守,預示著Ghrelin在脊椎動物中有著重要的生理功能與類似的作用機制。
[Abstract]:Ghrelin is an important bridge signal molecule related to reproduction and energy metabolism. The ghrelin gene of Monopterus Albus (Monopterus albus) was cloned and its gene structure and function were preliminarily analyzed. The full length of c DNA and DNA sequences of ghrelin gene of Monopterus Albus were obtained by rapid amplification of c DNA terminal. The results showed that the c DNA of Monopterus Albus was 552 bp (Gen Bank accession no.JX122807 in length, including the 5 '-terminal noncoding region of 115 bp, the complete open reading frame of 324 bp and the 3' -terminal non-coding region of 113 bp. The total length of DNA 1323 bp, consists of 3 introns and 4 exons. The intron splicing site has typical recognition nucleotide, GT/AG, 3 introns are 594 bp,84 bp and 93 bp, exons are 229bp,78 bp, respectively. 112 bp and 133 bp. Amino acid sequence analysis showed that the precursor (propreghrelin) sequence of Ghrelin protein derived from ghrelin gene was composed of signal peptide of 26 aa, mature peptide of 19 aa and C-terminal amino acid residues. The third position of mature peptide is serine (Ser3), which is the acylation site of Ghrelin, and the C-terminal amino acid residues probably include (Obestatin)., which antagonizes the function of Ghrelin mature peptide. The analysis of amino acid homology and evolution showed that the protein precursor of Monopterus Albus was highly similar to that of some Perciformes, and it was evolutionarily similar to the higher order Perciformes. The structure of ghrelin gene and some amino acid residues of its protein are highly conserved, indicating that Ghrelin has important physiological functions and similar mechanisms in vertebrates.
【作者單位】: 長江大學動物科學學院濕地生態(tài)與農業(yè)利用教育部工程研究中心;農業(yè)部淡水漁業(yè)和種質資源利用重點實驗室中國水產科學研究院淡水漁業(yè)研究中心;淡水水產健康養(yǎng)殖湖北省協(xié)同創(chuàng)新中心;
【基金】:湖北省自然科學基金(2013CFB393) 農業(yè)部淡水漁業(yè)與種質資源利用重點實驗室開放基金課題(KF201307) 國家支撐計劃課題(2013BAD20B06) 湖北省支撐計劃項目(2015BBA235) 湖北省高等學校優(yōu)秀中青年創(chuàng)新團隊項目(T201503)
【分類號】:S917.4

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