【摘要】：研究目的比較IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α和IFN-γ7種細(xì)胞因子及NLRP-3、GAST-5 m RNA在兒童AA和s-JIA中的表達(dá)水平,探究其在AA和S-JIA發(fā)病機(jī)制中的作用。研究對象及方法1.收集我院初治AA患兒38例(SAA為26例,N-SAA為12例)、初治JIA患兒28例(S-JIA為13例,少關(guān)節(jié)型JIA為15例)、正常健康體檢兒童(20例)的清晨空腹外周血各3ml入干燥管中,低速離心后提取上層血清保存于凍存管中,放-80℃保存?zhèn)溆?待標(biāo)本收集齊全后應(yīng)用Aimplex?Human Th1/Th2/Th17 7-plex kit試劑盒,利用流式細(xì)胞術(shù)檢測血清中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α和IFN-γ7種細(xì)胞因子的水平。2.收集我院AA患兒21例(SAA為13例,N-SAA為7例)、JIA患兒17例(S-JIA為8例,少關(guān)節(jié)型JIA為9例)的骨髓液各2ml,以及AA患兒32例(SAA為21例,N-SAA為11例)、JIA患兒28例(S-JIA為13例,少關(guān)節(jié)型JIA為15例)、正常健康體檢兒童(20例)的清晨空腹外周血各3ml,應(yīng)用密度梯度離心法分離骨髓單個核細(xì)胞,參照Trizol試劑說明書提取骨髓及外周血單個核細(xì)胞中總RNA,檢測RNA的純度及完整性;應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄試劑盒合成c DNA;采用Real-time PCR測定NLRP-3、GAST-5 m RNA的相對表達(dá)水平。結(jié)果1血清中細(xì)胞因子水平的比較:(1)在N-SAA組、SAA組及正常對照組中的比較:IL-2、IL-6、IL-17A、TNF-α、IFN-γ水平在SAA組均高于正常對照組,TNF-α、IFN-γ水平在SAA組高于N-SAA組,IL-4在SAA組和N-SAA組都低于正常對照組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);IL-10水平在N-SAA組、SAA組及正常對照組三組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)在S-JIA組、JIA少關(guān)節(jié)型組及正常對照組中的比較:IL-6、IL-17A、TNF-α水平S-JIA組高于正常對照組,TNF-α水平S-JIA組高于JIA少關(guān)節(jié)型組,IL-10水平在S-JIA組低于正常對照組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);IFN-γ水平JIA少關(guān)節(jié)型組和S-JIA組均高于正常對照組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);IL-2、IL-4水平S-JIA組與正常對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(3)在SAA組、S-JIA組及正常對照組中的比較:IL-2、IL-6、IL-10、IL-17A、IFN-γ水平在SAA組高于S-JIA組,IL-4、TNF-α水平在SAA組低于S-JIA組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2 GAST-5、NLRP-3 m RNA表達(dá)水平的比較:(1)在骨髓液中表達(dá)情況的比較GAST-5、NLRP-3 m RNA在S-JIA組高于N-SAA組、SAA組,GAST-5 m RNA在JIA少關(guān)節(jié)型組高于N-SAA組、SAA組,NLRP-3 m RNA在S-JIA組高于JIA少關(guān)節(jié)型組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)在外周血中表達(dá)情況的比較GAST-5、NLRP-3 m RNA在S-JIA組的表達(dá)水平均高于N-SAA組、SAA組及正常對照,NLRP3 m RNA在S-JIA組高于JIA少關(guān)節(jié)型組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(3)GAST-5、NLRP-3 m RNA分別在骨髓液及外周血中表達(dá)水平的比較GAST-5 m RNA在SAA組骨髓液中低于外周血,NLRP-3 m RNA在S-JIA組、JIA少關(guān)節(jié)型組骨髓液中的表達(dá)水平均高于外周血,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1.IL-6、IL-17、TNF-α和IFN-γ參與AA和s-JIA的發(fā)病機(jī)制;IL-6、IL-17和IFN-γ在AA中表達(dá)高于S-JIA,提示這3種細(xì)胞因子升高到一定界值后,可能會導(dǎo)致骨髓衰竭;TNF-α在S-JIA中表達(dá)高于AA,提示TNF-α在不同的界值水平,作用機(jī)制不同,導(dǎo)致不同的臨床表現(xiàn)。2.IL-4為AA造血的調(diào)節(jié)因子之一;IL-10可拮抗S-JIA的炎癥反應(yīng),抑制炎癥反應(yīng)的發(fā)生。3.GAST-5m RNA水平降低是導(dǎo)致AA骨髓衰竭及外周血三系減少的原因之一;NLRP-3 m RNA水平升高,是導(dǎo)致S-JIA產(chǎn)生產(chǎn)生炎癥反應(yīng)的重要影響因素之一。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R725.5

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本文編號：2332977