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棘腹蛙Ⅰ型干擾素基因的克隆與原核表達

發(fā)布時間:2018-11-11 19:21
【摘要】:干擾素(IFN)具有抗病毒、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)功能,具備較好的臨床應(yīng)用前景。為了解棘腹蛙干擾素的基因信息,本試驗明確了棘腹蛙Ⅰ型IFN基因ORF編碼長度為561 bp,編碼的蛋白質(zhì)含有1個信號肽和103aa的保守功能結(jié)構(gòu)域。遺傳進化分析顯示,棘腹蛙Ⅰ型IFN進化相對保守;其蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)主要由α螺旋構(gòu)成,細胞表面受體結(jié)合能力相對保守。將目的片段裝入原核表達載體pET32a并轉(zhuǎn)化BL21(DE3)進行蛋白表達與純化,獲得了預期蛋白。本研究證實了棘腹蛙Ⅰ型IFN屬于相對保守的典型Ⅰ型干擾素;為后期深入挖掘棘腹蛙IFN的生物學功能、促進廣譜抗病毒生物制劑研發(fā)提供了參考。
[Abstract]:Interferon (IFN) has antiviral, antitumor and immunomodulatory functions, and has a good clinical application prospect. In order to understand the gene information of IFNs, the protein encoded by 561 bp, ORF of the type I IFN gene of Rana spinosus contained a signal peptide and a conserved functional domain of 103aa. Genetic evolution analysis showed that the evolution of type I IFN was relatively conserved, and its protein structure was mainly composed of 偽 helix, and the receptor binding ability on cell surface was relatively conserved. The target fragment was inserted into prokaryotic expression vector pET32a and transformed into BL21 (DE3) for protein expression and purification. This study confirmed that the type I IFN belongs to the typical type I interferon which is relatively conserved, which provides a reference for further exploring the biological function of IFN and promoting the development of broad-spectrum antiviral biological agents.
【作者單位】: 重慶文理學院林學與生命科學學院重慶珍稀瀕危水產(chǎn)資源保護與開發(fā)研究中心;
【基金】:國家級大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃項目(201510642064) 重慶市科技計劃重點專項(cstc2015jcyjBX0013);重慶市科技計劃項目(cstc2014jcyjA80042) 重慶文理學院人才引進項目(R2013LS13,R2014LX07)
【分類號】:Q78;S917.4

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本文編號:2325874

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