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煙草NtGGPPS4基因的克隆和功能初步分析

發(fā)布時(shí)間:2018-09-19 11:36
【摘要】:為明確煙草r{牛兒基r{牛兒基焦磷酸合成酶基因Nt GGPPS4的功能,從普通煙草中克隆到該基因,構(gòu)建了超量表達(dá)載體p CAMBIA1300-Nt GGPPS4,并通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化煙草。進(jìn)一步測(cè)定了轉(zhuǎn)基因煙株中西柏烷二萜醇和質(zhì)體色素的含量。結(jié)果表明:共鑒定出4株Nt GGPPS4表達(dá)量明顯升高的轉(zhuǎn)基因植株,且轉(zhuǎn)基因植株中α-西柏三烯二醇(α-cembrenediol,α-CBD)和β-西柏三烯二醇(β-cembrenediol,β-CBD),以及新黃質(zhì)、紫黃質(zhì)、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b和β-胡蘿卜素等6種質(zhì)體色素含量都有顯著提高。表明Nt GGPPS4參與了煙草西柏烷二萜醇和類胡蘿卜素的生物合成。
[Abstract]:In order to clarify the function of Nt GGPPS4 gene of tobacco r {bovine pyrophosphate synthase gene, the gene was cloned from common tobacco, and the overexpression vector p CAMBIA1300-Nt GGPPS4, was constructed and transformed into tobacco by Agrobacterium tumefaciens (Agrobacterium tumefaciens). The contents of diterpene alcohol and plastid pigment in transgenic tobacco were further determined. The results showed that four transgenic plants with significantly increased Nt GGPPS4 expression were identified, and 偽 -cembrenediol (偽 -CBD) and 尾 -cembertrienediol (尾 -CBD), as well as neutrophin, purpuranthin, lutein, 尾 -CBD, 尾 -cembertrienediol (尾 -CBD) were identified. The contents of chlorophyll a, chlorophyll b and 尾-carotene were all increased significantly. The results showed that Nt GGPPS4 was involved in the biosynthesis of tobacco seborane diterpene alcohols and carotenoids.
【作者單位】: 中國(guó)煙草總公司鄭州煙草研究院;河南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)技術(shù)學(xué)院;河南中醫(yī)藥大學(xué)科技處;中國(guó)煙草總公司職工進(jìn)修學(xué)院;
【基金】:鄭州煙草研究院科技項(xiàng)目“煙草萜類化合物合成關(guān)鍵基因NtGGPPS功能分析和調(diào)控機(jī)制研究”(902012CZ340)
【分類號(hào)】:S572

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本文編號(hào):2250015

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