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黑尾葉蟬NcPGRP基因克隆及表達模式分析

發(fā)布時間:2018-08-15 17:52
【摘要】:為明確黑尾葉蟬肽聚糖識別蛋白(Nephotettix cincticeps peptidoglycan recognition protein,Nc PGRP)的功能,利用RT-PCR克隆長度為552 bp的Nc PGRP開放閱讀框,其編碼蛋白大小為19.9 k D,無信號肽,含3個鋅離子結(jié)合/酰胺酶催化位點,1個二氨基庚二酸型(Dap型)肽聚糖識別位點。系統(tǒng)發(fā)育分析表明,Nc PGRP與其他昆蟲親緣關(guān)系較遠。利用顯微注射技術(shù)對黑尾葉蟬進行病原細菌誘導(dǎo),定量PCR結(jié)果顯示Nc PGRP在受大腸桿菌及藤黃微球菌刺激后,其轉(zhuǎn)錄水平顯著上調(diào)。組織分布研究表明,Nc PGRP的m RNA在各組織中均有表達,且頭部表達量最高。黑尾葉蟬取食感染水稻普通矮縮病毒RDV的水稻后,Nc PGRP轉(zhuǎn)錄水平受抑制。本文研究表明,Nc PGRP是一種誘導(dǎo)型表達的PGRP,黑尾葉蟬感染RDV能顯著抑制其轉(zhuǎn)錄,進而削弱黑尾葉蟬免疫能力,這可能有利于RDV與黑尾葉蟬共生。
[Abstract]:In order to clarify the function of peptidoglycan recognition protein (Nephotettix cincticeps peptidoglycan recognition protein Nc PGRP, an open reading frame of NC PGRP was cloned by RT-PCR, which encoded a protein size of 19.9kD and no signal peptide. There are three zinc-binding / acylaminase catalytic sites and one Dap type peptidoglycan recognition site. Phylogenetic analysis showed that Nc PGRP was closely related to other insects. The microinjection technique was used to induce the pathogenic bacteria of Cicada nigra. The results of quantitative PCR showed that the transcription level of NC PGRP was upregulated significantly after being stimulated by E. coli and Micrococcus luteus. The study of tissue distribution showed that m RNA of Nc PGRP was expressed in all tissues, and the highest expression was found in the head. The transcription level of NC PGRP in rice infected with rice common dwarf virus (RDV) was inhibited. The results showed that Nc PGRP was an inducible expression of PGRP.The infection of RDV could significantly inhibit its transcription and further weaken its immune ability, which might be beneficial to the symbiosis of RDV and Cicadas nigra.
【作者單位】: 植物病蟲害生物學(xué)國家重點實驗室/中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所;浙江大學(xué)昆蟲科學(xué)研究所/農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)昆蟲學(xué)重點實驗室;
【基金】:國家“973計劃”(2014CB138404)
【分類號】:S435.112

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本文編號:2184964

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