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靶向腫瘤多藥耐藥基因MDR1 siRNA的設計與篩選

發(fā)布時間:2018-08-04 21:59
【摘要】:本研究主要考察siRNA對于逆轉P-糖蛋白介導的腫瘤多藥耐藥的作用。以MDR1基因為靶標,在線設計MDR1基因的siRNA序列并利用生物學軟件進行優(yōu)化,經化學合成后轉染入體外培養(yǎng)的乳腺癌耐藥細胞系MCF-7/ADR中,經實時定量熒光PCR和Western blot定量分析MDR1基因的表達,以MTT法檢測轉染細胞對多柔比星的敏感性。最終設計并合成了8條MDR1基因siRNA序列,其中4條能有效抑制MDR1基因mRNA的表達。siRNA1沉默效率最高,可特異性地沉默MDR1基因,有效逆轉乳腺癌細胞的多藥耐藥性。
[Abstract]:The purpose of this study was to investigate the effect of siRNA on reversing P-glycoprotein-mediated multi-drug resistance in tumors. The siRNA sequence of MDR1 gene was designed on line with MDR1 gene as target, and optimized by biological software. After chemical synthesis, it was transfected into breast cancer cell line MCF-7/ADR, which was cultured in vitro. The expression of MDR1 gene was quantitatively analyzed by real-time quantitative PCR and Western blot. The sensitivity of transfected cells to doxorubicin was detected by MTT assay. Finally, eight siRNA sequences of MDR1 gene were designed and synthesized. Four of them could effectively inhibit the expression of mRNA of MDR1 gene. SiRNA1 silenced the MDR1 gene specifically and reversed the multidrug resistance of breast cancer cells.
【作者單位】: 河北醫(yī)科大學藥學院;河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院;石家莊人民醫(yī)學高等?茖W校;
【基金】:河北省應用基礎研究計劃重點基礎研究項目(12966417D) 河北省自然科學基金(H2012206039)
【分類號】:R73-3

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