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利用微滴式數(shù)字PCR技術(shù)分析轉(zhuǎn)基因玉米抗除草劑標(biāo)記基因EPSP拷貝數(shù)

發(fā)布時(shí)間:2018-07-12 19:02

  本文選題:微滴式數(shù)字PCR + 轉(zhuǎn)基因玉米。 參考:《華北農(nóng)學(xué)報(bào)》2017年03期


【摘要】:基于微滴式數(shù)字PCR(Droplet digital PCR,ddPCR)平臺(tái),以轉(zhuǎn)基因玉米為例,建立了轉(zhuǎn)基因作物(Genetically modified crops,GM crops)外源基因拷貝數(shù)分析方法,對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行了快速鑒定,并從T_0轉(zhuǎn)基因玉米株系中鑒定出多個(gè)單拷貝單株。對(duì)該方法與實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)方法在分析結(jié)果的準(zhǔn)確性方面進(jìn)行了比較,從試驗(yàn)數(shù)據(jù)可以看出,2種檢測(cè)方法的結(jié)果比較一致,單拷貝檢測(cè)結(jié)果高度一致;但是ddPCR試驗(yàn)操作更加簡(jiǎn)便,試驗(yàn)結(jié)果可重復(fù)性強(qiáng),試驗(yàn)數(shù)據(jù)更加準(zhǔn)確可靠。研究表明,ddPCR方法是一種更加便捷、快速和準(zhǔn)確的外源基因拷貝數(shù)分析新方法,基于其在準(zhǔn)確性和靈敏度方面的顯著優(yōu)勢(shì),將會(huì)在轉(zhuǎn)基因作物的外源基因拷貝數(shù)分析中得到廣泛的應(yīng)用。
[Abstract]:Based on droplet digital PCR (droplet digital PCR) platform and taking transgenic maize as an example, a copy number analysis method of exogenous genes in transgenic crops (genetically modified cropsp GM crops) was established, and the samples were identified quickly. Multiple single copy plants were identified from transgenic maize lines. The accuracy of this method was compared with that of quantitative real-time PCR (quantitative real-time PCR). From the experimental data, we can see that the results of the two methods are consistent, and the results of single copy detection are highly consistent. But the ddPCR test is more simple, the test results are more reproducible, and the test data are more accurate and reliable. Studies have shown that the PCR method is a more convenient, rapid and accurate method for the analysis of copy number of foreign genes, based on its remarkable advantages in accuracy and sensitivity. It will be widely used in foreign gene copy number analysis of transgenic crops.
【作者單位】: 長(zhǎng)江大學(xué)農(nóng)學(xué)院主要糧食作物產(chǎn)業(yè)化湖北省協(xié)同創(chuàng)新中心;北京市農(nóng)林科學(xué)院北京農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究中心北京市農(nóng)業(yè)基因資源和生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國(guó)家轉(zhuǎn)基因重大專項(xiàng)重點(diǎn)課題(2014ZX0800303B) 北京市農(nóng)林科學(xué)院科研能力創(chuàng)新項(xiàng)目 北京市科委項(xiàng)目(Z171100001517001)
【分類號(hào)】:S513

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前9條

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9 陳向明;;用CTAB法提取植物DNA的技術(shù)改進(jìn)[J];合肥教育學(xué)院學(xué)報(bào);2000年04期

【共引文獻(xiàn)】

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1 王r,

本文編號(hào):2118179


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