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滇牡丹類黃酮3-O-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶基因的鑒定及表達(dá)分析

發(fā)布時(shí)間:2018-06-19 18:08

  本文選題:滇牡丹 + GT ; 參考:《基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)》2017年04期


【摘要】:在植物中,類黃酮3-O-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(F3GT)將不穩(wěn)定的花色素轉(zhuǎn)變?yōu)榉(wěn)定的花色素苷,是花色素苷形成的關(guān)鍵酶。本研究采樣RT-PCR技術(shù)從滇牡丹中成功克隆獲得一個(gè)完整的F3GT基因(Pd F3GT1),其含有1 371 bp的開(kāi)放閱讀框(ORF),編碼456個(gè)氨基酸。該基因推斷的蛋白與葡萄(Vitis vinifera)3GT蛋白的相似性為64%;與已知功能的3GT基因進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化分析,結(jié)果顯示Pd3GT1與葡萄3GT聚類到同一個(gè)分支。氨基酸比對(duì)顯示Pd3GT1蛋白序列還有糖基轉(zhuǎn)移酶家族特有的PSPG-box結(jié)構(gòu)域。半定量PCR結(jié)果顯示:Pd3GT1在花蕾,花開(kāi)時(shí)期的花瓣中大量表達(dá),在葉和花芽中有微弱表達(dá);在根和莖中沒(méi)有表達(dá)。說(shuō)明Pd3GT基因表達(dá)具有組織表達(dá)特異性。該研究將為研究滇牡丹花色素形成機(jī)理,以及對(duì)滇牡丹類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶的功能鑒定和利用基因工程手段改良花卉品質(zhì)提供理論依據(jù)。
[Abstract]:In plants, flavonoid 3-O- glucosyltransferase F3GT) converts unstable anthocyanins into stable anthocyanins, which is the key enzyme for anthocyanin formation. In this study, a complete F3GT gene, Pd-F3GT1, was successfully cloned from Peony by sampling RT-PCR, which contained an open reading frame of 1 371 BP, encoding 456 amino acids. The similarity between the deduced protein and Vitis vinifera 3GT protein was 64, and the phylogenetic analysis showed that Pd3GT1 and grape 3GT were clustered into the same branch. Amino acid alignment showed that the Pd3GT1 protein sequence and the PSPG-box domain of the glycosyltransferase family. The results of semi-quantitative PCR showed that Pd3GT1 was strongly expressed in flower buds and petals at flowering stage, but weakly in leaves and flower buds, but not in roots and stems. The results showed that the expression of PD 3 GT gene had tissue expression specificity. This study will provide a theoretical basis for the study of the formation mechanism of pigment, the function identification of flavonoid glycosyltransferase and the improvement of flower quality by genetic engineering.
【作者單位】: 云南林業(yè)學(xué)科院云南省森林植物培育與開(kāi)發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;云南林業(yè)學(xué)科院國(guó)家林業(yè)局云南珍稀瀕特森林植物繁育和保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;西南林業(yè)大學(xué);
【基金】:云南省林業(yè)科學(xué)院重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室自主創(chuàng)新項(xiàng)目(22CX2016-05) 云南省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2015A005) 云南省應(yīng)用基礎(chǔ)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(2013FA054)共同資助
【分類號(hào)】:Q943.2;S685.11

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本文編號(hào):2040802

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