本文選題：質粒 + 耐多藥　； 參考：《西南醫(yī)科大學》2016年碩士論文

【摘要】：目的:自從20世紀90年代末期第一次發(fā)現qnr基因后,全國各地就陸陸續(xù)續(xù)有報道稱發(fā)現其同源性基因及相應亞型,且各國家、各地區(qū)的檢出情況及同源性基因的分布情況各不相同。本次研究的目的在于了解瀘州地區(qū)大腸埃希菌的藥敏情況,及首次探討qnrB、qnrS、qnrA基因的分布情況和耐藥特征,以更好的為臨床用藥提供依據。方法:1.實驗菌株的準備:將臨床分離的155株細菌復蘇于LB培養(yǎng)基上,挑選生長良好的菌落1-2個接種于TSB肉湯營養(yǎng)液中培養(yǎng)18-24小時,菌液渾濁后置于4℃冰箱保存,以供后續(xù)實驗所用。2.PCR檢測:根據細菌TIANprep Mini Plasmid Kit使用說明書,對已培養(yǎng)的細菌進行質粒DNA的提取,使用3對已合成的引物及相關反應液,配制25ul反應體系,進行PCR擴增反應。反應結束后將產物用于瓊脂糖凝膠電泳,在凝膠DNA成像儀下觀察,將陽性條帶產物圖照相及保存。將條帶清晰的PCR陽性產物送上海生工公司測序。3.藥物敏感性試驗:即K-B法(紙片擴散法),對155株大腸埃希菌進行藥敏試驗分析,觀察其對如下抗生素的耐藥情況:阿米卡星(AMK)、萘啶酸(NA)、慶大霉素(GEN)、環(huán)丙沙星(CIP)、莫西沙星(MXF)、左氧氟沙星(LEV)、頭孢噻肟(CTX)、諾氟沙星(NOR)、頭孢他啶(CAZ)、亞胺培南(IPM)、頭孢哌酮/舒巴坦(SCF)、頭孢噻肟/克拉維酸(CTC)、頭孢他啶/克拉維酸(CAC)。4.ESBLs篩選試驗:用CTX及CTC、CAZ及CAC抗生素紙片做初篩和確認試驗,結果的判斷參照NCCLS(美國臨床實驗室標準化委員會)的標準。加克拉維酸及不加克拉維酸的抑菌環(huán)直徑相差大于等于5mm,即可確認為esbls菌株。結果:1.pcr結果:檢出qnr陽性菌共29株(20.65%)。其中qnra檢出4株,占2.58%;qnrb檢出19株,12.26%;qnrs檢出9株,占5.81%。其中3株細菌同時檢出不同型qnr基因,分別是qnra及qnrb、qnrb及qnrs、qnra及qnrs。2.藥敏實驗結果:1)155株大腸埃希菌對mxf及imp敏感率達100%;對scf敏感性較高,達98.71%,對na、caz、gen、ctx、amk、scf、cip、lev、nor的耐藥率分別為70.97%、29.03%、49.03%、58.06%、2.58%、1.29%、51.61%、33.54%、54.84%。2)耐多藥菌株占28.39%、雙耐菌株占25.16%,單耐菌株占26.45%,全敏菌株占20%。耐多藥模式表型以耐caz/ctx+gen+na/nor/cip為主,共計39株,占耐多藥菌的88.64%;雙耐模式表型以耐na/nor/cip+gen為主,共計23株,占雙耐菌的58.97%;單耐表型以耐na/cip/nor為主,共計25株,占單耐菌的60.98%。3.esbls檢出情況:155株細菌中,共檢出esbls(+)菌總計97株,占62.58%。耐多藥菌株中,97.72%的菌株為esbls(+)菌,雙耐藥菌株中esbls(+)占89.74%,單耐藥菌株中esbls(+)占46.34%。4.qnr基因的分布情況:1)qnr陽性菌株與陰性菌株對11種抗生素(包括喹諾酮類藥物)耐藥率的比較中,其耐藥率無顯著差別(p值均大于0.05,統計學無意義)。2)qnr基因對esbls(+)菌及esbls(-)菌的影響的比較中,其p=0.001,差異有統計學意義。qnr陽性菌株主要分布在雙耐及耐多藥菌株中,達72.41%,統計學處理,p值小于0.05,差異有統計學意義。結論:1.瀘州地區(qū)臨床分離的實驗菌株對三類常用抗生素的耐藥情況仍較普遍,且其耐多藥、雙耐藥情況較常見,但均較過去有所改善。2.瀘州地區(qū)臨床分離的大腸埃希菌esbls(+)菌檢出率達62.58%,且主要分布在耐多藥菌及雙耐藥菌株中。3.瀘州地區(qū)的大腸埃希菌qnr基因檢測率達20.65%,且主要位于ESBLs(+)菌中。4.qnr基因主要分布在耐多藥及雙耐藥模式菌株中。
[Abstract]:Objective : To study the susceptibility of Escherichia coli in Luzhou area . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . The results were as follows : 1 . Polymerase chain reaction was carried out on 155 strains of Escherichia coli . There were 19 strains of qnrb , 19.03 % , 58.06 % , 25.16 % , 49.03 % , 58.06 % , 2.58 % , 98.71 % , 51.61 % , 33.54 % , 54.84 % respectively . The results showed that the detection rate of esbls ( + ) and esbls ( + ) was 62.58 % .
【學位授予單位】：西南醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R446.5

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7 吳

本文編號：1957062