本文選題：發(fā)熱伴出疹 + 多重PCR�。� 參考：《軍事醫(yī)學(xué)》2017年02期

【摘要】：目的建立一種能同時(shí)、快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)包括:麻疹病毒、風(fēng)疹病毒、腸道病毒71型、水痘帶狀皰疹病毒、登革熱病毒、人類小DNA病毒B19、柯薩奇病毒A16型、A組β型釀膿鏈球菌(溶血性鏈球菌)、傷寒沙門菌,9種發(fā)熱伴出疹病原體的化學(xué)發(fā)光基因芯片的方法。方法根據(jù)9種病原體特異基因中的高度保守區(qū)序列設(shè)計(jì)引物與探針,進(jìn)行多重不對(duì)稱PCR擴(kuò)增,將帶有標(biāo)記的擴(kuò)增產(chǎn)物與帶有特異性探針的芯片雜交,經(jīng)洗滌、化學(xué)發(fā)光顯色后進(jìn)行結(jié)果分析。經(jīng)多重PCR體系、雜交反應(yīng)和化學(xué)發(fā)光檢測(cè)條件的優(yōu)化,評(píng)價(jià)該芯片的特異性、靈敏度和重復(fù)性。實(shí)時(shí)熒光PCR法與芯片法分別檢測(cè)腸道病毒EV71梯度稀釋的核酸,比較兩種方法的靈敏度。結(jié)果共篩選出9對(duì)特異性擴(kuò)增引物和11條特異性檢測(cè)探針。該芯片具有良好的特異性、靈敏度和重復(fù)性。質(zhì)粒參考品和體外轉(zhuǎn)錄RNA參考品的最低檢測(cè)限為3×10~3拷貝/反應(yīng),芯片法的靈敏度為實(shí)時(shí)熒光PCR法的1/10。檢測(cè)74例臨床樣本的靈敏度為95%,特異性為85.7%,總符合率為93.2%。結(jié)論建立了一種可同時(shí)檢測(cè)9種發(fā)熱伴出疹病原體的化學(xué)發(fā)光基因芯片的檢測(cè)方法,為發(fā)熱伴出疹的臨床診斷和流行病學(xué)調(diào)查提供了一種高通量的篩查手段。
[Abstract]:Objective to establish a method for simultaneous, rapid and accurate detection of measles virus, rubella virus, enterovirus 71, varicella zoster virus and dengue virus. Methods of chemiluminescent gene microarray for human small DNA virus B19, Coxsackievirus A16 A group 尾 -Streptococcus pyogenes (Streptococcus haemolyticus, Salmonella typhimurium, 9 kinds of febrile pathogens with rash). Methods primers and probes were designed according to the highly conserved region sequences of 9 pathogen specific genes and amplified by multiple asymmetric PCR. The labeled products were hybridized with microarray with specific probes. The results were analyzed after chemiluminescence. The specificity, sensitivity and repeatability of the chip were evaluated by optimization of multiple PCR system, hybridization reaction and chemiluminescence detection conditions. The sensitivity of the two methods was compared by real-time fluorescence PCR method and chip method for detecting the gradient dilution nucleic acid of enterovirus EV71. Results A total of 9 pairs of specific amplified primers and 11 specific detection probes were screened. The chip has good specificity, sensitivity and repeatability. The minimum detection limit of plasmid reference and in vitro transcription RNA reference was 3 脳 10 ~ 3 copies / reaction. The sensitivity of chip assay was 1 / 10 of that of real-time fluorescent PCR method. The sensitivity and specificity of 74 clinical samples were 95 and 85.7 respectively. The total coincidence rate was 93.2%. Conclusion A chemiluminescence gene chip method for simultaneous detection of 9 fever and rash pathogens was established, which provides a high-throughput screening method for clinical diagnosis and epidemiological investigation of fever with rash.
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué);軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所;浙江省疾病預(yù)防控制中心;
【基金】：國(guó)家科技重大專項(xiàng)傳染病應(yīng)急處置檢測(cè)技術(shù)平臺(tái)資助項(xiàng)目(2011ZX10004-001)
【分類號(hào)】：R440;R511

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9 王虹崢;英子;;基因芯片技術(shù)與中藥現(xiàn)代化[A];全面建設(shè)小康社會(huì)：中國(guó)科技工作者的歷史責(zé)任——中國(guó)科協(xié)2003年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（上）[C];2003年

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6 平安證券綜合研究所 馬超 高利;基因芯片：方寸之間天地寬[N];中國(guó)證券報(bào);2000年

7 記者 季洪光;基因芯片可望大規(guī)模臨床應(yīng)用[N];科技日?qǐng)?bào);2003年

8 ;基因芯片——新世紀(jì)醫(yī)學(xué)的“寵兒”[N];市場(chǎng)報(bào);2001年

9 周向東;基因芯片：神奇的醫(yī)生[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2001年

10 匯正財(cái)經(jīng);G星湖 主升浪在即[N];證券時(shí)報(bào);2006年

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3 王川;基因芯片數(shù)據(jù)管理及數(shù)據(jù)挖掘[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2004年

4 劉全俊;三類新型集成化的基因芯片及其相關(guān)儀器的研制[D];東南大學(xué);2006年

5 徐曉靜;新發(fā)腸道致病菌檢測(cè)基因芯片的研制及初步應(yīng)用[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

6 曹三杰;雞新城疫、雞傳染性支氣管炎基因芯片的構(gòu)建及其檢測(cè)技術(shù)研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

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8 吳飛珍;基因芯片數(shù)據(jù)的聚類功能評(píng)價(jià)算法和判別分析算法研究[D];上海大學(xué);2009年

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7 謝松e，

本文編號(hào)：1905459