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大豆CHI1基因啟動子的克隆及功能初探

發(fā)布時間:2018-05-15 18:54

  本文選題:幾丁質(zhì)酶 + 啟動子 ; 參考:《華北農(nóng)學(xué)報》2017年04期


【摘要】:為了解大豆ClassⅠ幾丁酶基因(Chitinase gene)對不同脅迫響應(yīng)的分子機(jī)制。利用PCR技術(shù)克隆了大豆ClassⅠChitinase基因的啟動子片段(Gm CHI1p),序列分析表明,擴(kuò)增片段(1 641 bp)與Gen Bank中的已知序列同源性達(dá)99.8%,且含有多個脅迫響應(yīng)調(diào)控元件。利用GUS基因上游無啟動子的表達(dá)載體p CAMBIA1391Z,構(gòu)建GmCHI1p與GUS基因融合的植物表達(dá)載體pCAM-Gm CHI1p,并通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法導(dǎo)入煙草中。在轉(zhuǎn)基因煙草愈傷組織中檢測到GUS活性,表明該啟動子具有啟動活性。對轉(zhuǎn)基因煙草中的GUS活性進(jìn)行初步定性分析,結(jié)果表明,GmCHI1p可驅(qū)動GUS基因在轉(zhuǎn)基因煙草的根部特異性表達(dá),而且在傷害處理的葉片中檢測到GUS的強(qiáng)烈表達(dá),表現(xiàn)出明顯的根組織特異性及傷害誘導(dǎo)性。這種傷害誘導(dǎo)僅在傷害組織部位及其附近高效表達(dá)而沒有被長距離傳遞,預(yù)計該啟動子在轉(zhuǎn)基因抗蟲分子育種中具有巨大的應(yīng)用前景。
[Abstract]:In order to understand the molecular mechanism of soybean Class 鈪,

本文編號:1893505

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