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大豆肌醇加氧酶基因響應(yīng)線蟲脅迫的表達(dá)分析

發(fā)布時(shí)間:2018-05-12 19:55

  本文選題:大豆肌醇加氧酶 + 大豆胞囊線蟲; 參考:《中國油料作物學(xué)報(bào)》2017年06期


【摘要】:肌醇加氧酶通常與植物細(xì)胞壁的合成以及誘導(dǎo)合胞體發(fā)育相關(guān)。為確定大豆胞囊線蟲侵染大豆根部后,肌醇加氧酶基因表達(dá)水平的變化,以感病品種遼豆15和抗病品種灰皮支黑豆、哈爾濱小黑豆和小粒黑豆為試驗(yàn)材料,在人工接種大豆胞囊線蟲3號(hào)生理小種后,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測肌醇加氧酶家族基因表達(dá)量。結(jié)果表明,抗病品種中GmMIOX2基因均在接種后5d表達(dá)量達(dá)到最大,而感病品種變化并不明顯。GmMIOX4基因在抗病品種灰皮支黑豆、哈爾濱小黑豆和小粒黑豆中表達(dá)量分別在接種后5d,20d和10d顯著高于感病品種的表達(dá)量。表明GmMIOX2和GmMIOX4基因與大豆胞囊線蟲發(fā)育調(diào)控相關(guān)。通過擴(kuò)增Gm MIOX基因的CDS序列,構(gòu)建GFP融合表達(dá)載體p CAMBIA1303-MIOX2和p CAMBIA1303-MIOX4,農(nóng)桿菌浸潤法注射本氏煙葉片進(jìn)行亞細(xì)胞定位觀察,GmMIOX2蛋白主要分布在細(xì)胞膜,GmMIOX4蛋白主要分布在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜。生物信息學(xué)分析表明,GmMIOX2和GmMIOX4蛋白結(jié)構(gòu)域主要由α螺旋構(gòu)成,蛋白序列進(jìn)化分析發(fā)現(xiàn)GmMIOX2和GmMIOX4分別與擬南芥At MIOX1、At MIOX4親緣性較近。
[Abstract]:Inositol oxygenase is usually associated with the synthesis of plant cell walls and the induction of syncytial development. In order to determine the changes of inositol oxygenase gene expression in soybean roots infected by soybean cyst nematode, the susceptible cultivar Liaodou 15, the disease-resistant variety Liaopizhi black bean, Harbin small black bean and small black bean were used as experimental materials. After inoculation of soybean cyst nematode No. 3 physiological race, real-time fluorescence quantitative PCR was used to detect the gene expression of inositol oxygenase family. The results showed that the expression of GmMIOX2 gene reached the maximum at 5 days after inoculation, while the expression of GmMIOX4 gene was not obvious in the resistant variety. The expression levels in Harbin small black bean and small black bean were significantly higher than those in susceptible varieties at 20 days and 10 days after inoculation respectively. The results showed that GmMIOX2 and GmMIOX4 genes were related to the development and regulation of soybean cyst nematode. By amplifying the CDS sequence of GM MIOX gene, the GFP fusion expression vectors p CAMBIA1303-MIOX2 and p CAMBIA1303-MIOX4 were constructed. The subcellular localization of GmMIOX2 protein was observed by Agrobacterium tumefaciens infiltration method. The GmMIOX4 protein mainly distributed in the cytoplasm and cell membrane. Bioinformatics analysis showed that the protein domains of GmMIOX2 and GmMIOX4 were mainly composed of 偽 helix. The phylogenetic analysis of GmMIOX2 and GmMIOX4 showed that GmMIOX2 and GmMIOX4 were close to Arabidopsis thaliana at MIOX4.
【作者單位】: 沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)生物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院;沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院;
【基金】:國家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目資助(31330063)
【分類號(hào)】:S435.651

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本文編號(hào):1879941

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