大腸埃希菌ETT2毒力島ECs3703基因和HPI毒力島irp2基因雙重LAMP檢測方法的建立
發(fā)布時間:2018-05-03 04:25
本文選題:大腸埃希菌 + ETT毒力島; 參考:《動物醫(yī)學進展》2017年01期
【摘要】:根據GenBank中大腸埃希菌ETT2毒力島保守基因ECs3703和HPI毒力島的保守基因irp2分別設計一套LAMP引物,在同一體系中進行LAMP擴增,通過對體系Mg2+、dNTP、內引物及反應溫度和反應時間等進行優(yōu)化,建立了在60℃恒溫下對大腸埃希菌ETT2和HPI毒力島進行同步檢測的LAMP方法,并進行了特異性和靈敏性試驗。結果顯示,所建立的雙重LAMP檢測方法同時檢測ETT2和HPI毒力島大腸埃希菌檢測限均可達到100fg,比常規(guī)PCR靈敏度高100倍。利用該方法對8株非大腸埃希菌進行LAMP擴增,結果均為陰性。用該方法對采集的20份臨床樣品進行檢測,與雙重PCR檢測結果一致。結果顯示,該雙重LAMP方法可用于大腸埃希菌ETT2和HPI毒力島的同步快速檢測,可作為臨床疫病診斷的有效手段。
[Abstract]:According to the conserved gene irp2 of Escherichia coli ETT2 virulence island ECs3703 and HPI virulence island in GenBank, a set of LAMP primers were designed for LAMP amplification in the same system. The system was optimized by Mg2 dNTP, internal primer, reaction temperature and reaction time. A LAMP method for simultaneous detection of Escherichia coli ETT2 and HPI virulence islands at 60 鈩,
本文編號:1836970
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