本文選題：舞毒蛾 + 轉(zhuǎn)基因果蠅　； 參考：《林業(yè)科學(xué)》2017年06期

【摘要】：【目的】舞毒蛾是林業(yè)重要害蟲(chóng),細(xì)胞色素P450是昆蟲(chóng)體內(nèi)廣泛分布的參與外源化合物代謝關(guān)鍵酶系,探討P450家族基因CYP6AN15v1對(duì)殺蟲(chóng)劑代謝解毒功能,為舞毒蛾有效治理提供依據(jù)�！痉椒ā客ㄟ^(guò)RT-PCR法獲得Ld CYP6AN15v1基因c DNA全長(zhǎng),采用傳統(tǒng)酶切連接的方法構(gòu)建轉(zhuǎn)CYP6AN15v1基因果蠅載體,通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得表達(dá)Ld CYP6AN15v1果蠅品系(命名為att P40CYP6AN15v1)。采用分光光度計(jì)法研究低劑量氯蟲(chóng)苯甲酰胺(7.17mg·L~(-1))處理對(duì)轉(zhuǎn)基因和非轉(zhuǎn)基因果蠅品系細(xì)胞色素P450活性的影響,并采用qRT-PCR法測(cè)定其對(duì)CYP6AN15v1基因表達(dá)的影響�！窘Y(jié)果】從舞毒蛾無(wú)參照轉(zhuǎn)錄本文庫(kù)中克隆獲得CYP6AN15v1全長(zhǎng)基因,編碼512個(gè)氨基酸,蛋白分子質(zhì)量為59.02 k Da;系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析表明CYP6AN15v1與甜菜夜蛾和棉鈴蟲(chóng)關(guān)系較近。以DNA和c DNA為模板,att P40CYP6AN15v1果蠅品系均檢測(cè)到1 539 bp目的基因,表明Ld CYP6AN15v1基因成功整合到果蠅基因組。與非轉(zhuǎn)基因att P40果蠅品系相比,轉(zhuǎn)基因att P40CYP6AN15v1果蠅品系對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺的敏感性顯著降低,致死中濃度LC50為非轉(zhuǎn)基因果蠅的2.92倍;低劑量(7.17 mg·L~(-1))氯蟲(chóng)苯甲酰胺脅迫下,舞毒蛾細(xì)胞色素P450酶活性和CYP6AN15v1基因的誘導(dǎo)作用呈現(xiàn)時(shí)間效應(yīng),att P40CYP6AN15v1果蠅品系P450活性為非轉(zhuǎn)基因果蠅的1.09~1.93倍,主要表現(xiàn)為誘導(dǎo)效應(yīng);att P40CYP6AN15v1果蠅品系的CYP6AN15v1基因mRNA表達(dá)量呈誘導(dǎo)激活,其表達(dá)量為非轉(zhuǎn)基因的44.54~137.80倍�！窘Y(jié)論】利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)成功構(gòu)建了轉(zhuǎn)Ld CYP6AN15v1果蠅品系att P40CYP6AN15v1;氯蟲(chóng)苯甲酰胺可能通過(guò)誘導(dǎo)Ld CYP6AN15v1基因mRNA的上調(diào)表達(dá)而增強(qiáng)黑腹果蠅P450酶活性,從而參與對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺的解毒作用。
[Abstract]:[objective] Cytochrome P450 is one of the most important insect pests in forestry. Cytochrome P450 is the key enzyme system involved in the metabolism of exogenous compounds, and the detoxification function of P450 family gene CYP6AN15v1 on the metabolism of insecticides was studied. [methods] the full-length c DNA of Ld CYP6AN15v1 gene was obtained by RT-PCR method. The transgenic Drosophila vector of CYP6AN15v1 gene was constructed by traditional restriction endonuclease ligation method. The expression of Ld CYP6AN15v1 Drosophila strain (named att P40CYP6AN15v1) was obtained by transgenic technique. The effects of low dose chlorfenzoate (7.17mg / L) treatment on cytochrome P450 activity in transgenic and non-transgenic Drosophila strains were studied by spectrophotometer. The effect of CYP6AN15v1 on the expression of CYP6AN15v1 gene was determined by qRT-PCR method. [results] the full-length CYP6AN15v1 gene was cloned from the library of non-reference transcripts of Hymenoptera moths and encoded 512 amino acids. The molecular weight of protein was 59.02 K Da.The phylogenetic tree analysis showed that CYP6AN15v1 had close relationship with Spodoptera exigua and Helicoverpa armigera. Using DNA and c DNA as templates, 1 539bp target gene was detected in Drosophila melanogaster strains, indicating that Ld CYP6AN15v1 gene was successfully integrated into the genome of Drosophila melanogaster. Compared with non-transgenic att P40 strain, the sensitivity of transgenic att P40CYP6AN15v1 Drosophila strain to chlorobenzamide was significantly decreased, the median lethal concentration of LC50 was 2.92 times of that of non-transgenic Drosophila melanogaster, and the low dose of LC50 was 7.17 mg / L ~ (-1) under benzoamide stress. The activity of cytochrome P450 enzyme and the induction of CYP6AN15v1 gene showed a time effect of 1.09 times of that of non-transgenic Drosophila melanogaster strain P450, which mainly showed that the expression of CYP6AN15v1 gene mRNA was induced and activated. [conclusion] transgenic fruit fly strain att P40CYP6AN15v1 was successfully constructed by transgenic technique, and chlorfenzoamide may enhance the P450 activity of Drosophila melanogaster by inducing the up-regulation of mRNA expression of Ld CYP6AN15v1 gene. Thus participate in the detoxification of p-chlorfenzoamide.
【作者單位】： 東北林業(yè)大學(xué)林學(xué)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31570642) 黑龍江省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(C201409) 東北林業(yè)大學(xué)本科生創(chuàng)新項(xiàng)目(201510225183)
【分類號(hào)】：S763.42

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 薛緒亭;孫麗麗;劉鵬;王志英;曹傳旺;;表達(dá)LdCYP6B53果蠅品系建立及對(duì)殺蟲(chóng)劑的敏感性[J];中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào);2016年19期

2 孫麗麗;劉鵬;王志英;梁斌;曹傳旺;;轉(zhuǎn)LdOA1基因果蠅品系GSTs基因表達(dá)及對(duì)溴氰菊酯脅迫響應(yīng)[J];北京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2016年06期

3 王學(xué)貴;余慧靈;梁沛;史雪巖;宋敦倫;高希武;;氯蟲(chóng)苯甲酰胺誘導(dǎo)甜菜夜蛾細(xì)胞色素P450基因上調(diào)表達(dá)[J];昆蟲(chóng)學(xué)報(bào);2015年03期

4 邱星輝;;細(xì)胞色素P450介導(dǎo)的昆蟲(chóng)抗藥性的分子機(jī)制[J];昆蟲(chóng)學(xué)報(bào);2014年04期

5 歐善生;梁沛;宋敦倫;史雪巖;高希武;;氯蟲(chóng)苯甲酰胺亞致死劑量對(duì)棉鈴蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育和解毒酶活性的影響[J];植物保護(hù);2012年04期

6 邢靜;梁沛;高希武;;亞致死濃度氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)小菜蛾藥劑敏感度和解毒酶活性的影響[J];農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào);2011年05期

7 陳偉國(guó);董瑞華;孫海燕;戴建忠;朱浩龍;吳福安;;農(nóng)用殺蟲(chóng)劑氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)家蠶的毒性研究[J];蠶業(yè)科學(xué);2010年01期

8 劉熠;王國(guó)勝;;魚(yú)尼丁受體類新型殺蟲(chóng)劑氯蟲(chóng)酰胺的研究概述[J];化學(xué)工程師;2009年12期

9 侯雅芹;南楠;李鎮(zhèn)宇;;舞毒蛾研究進(jìn)展[J];河北林果研究;2009年04期

10 許娜;孫寶麗;;舞毒蛾的發(fā)生及防治[J];現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技;2009年17期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李濤;劉敏;劉增虎;陳安利;廖鵬飛;楊海;董占鵬;;家蠶對(duì)溴蟲(chóng)腈的耐受性及與體內(nèi)細(xì)胞色素P450和b5含量的關(guān)聯(lián)性[J];蠶業(yè)科學(xué);2017年03期

2 黨英僑;殷晶晶;陳傳佳;孫麗麗;劉鵬;曹傳旺;;轉(zhuǎn)舞毒蛾LdCYP6AN15v1基因果蠅品系對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺脅迫響應(yīng)[J];林業(yè)科學(xué);2017年06期

3 全林發(fā);仇貴生;孫麗娜;李艷艷;閆文濤;岳強(qiáng);張懷江;;高效氯氰菊酯亞致死濃度對(duì)桃小食心蟲(chóng)成蟲(chóng)體內(nèi)解毒酶活性的影響[J];農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào);2017年03期

4 薛羿;姜礅;姜虹;楊麗娜;嚴(yán)善春;;亞洲型舞毒蛾的羽化和生殖行為節(jié)律[J];東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2017年05期

5 陳羿渠;向興;貢常委;王學(xué)貴;;氯蟲(chóng)苯甲酰胺亞致死劑量對(duì)甜菜夜蛾主要解毒酶活性與生長(zhǎng)繁殖的影響[J];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué);2017年08期

6 趙玉玉;李帥;李怡萍;許向利;成衛(wèi)寧;王熠;仵均祥;;中國(guó)陜晉兩省部分地區(qū)粘蟲(chóng)田間種群的抗藥性[J];農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào);2017年02期

7 張文領(lǐng);牟希東;胡隱昌;宋紅梅;;福壽螺細(xì)胞色素P450基因CYP3192A1的克隆與表達(dá)分析[J];南方水產(chǎn)科學(xué);2017年01期

8 王彩云;楊亞軍;徐紅星;鄭許松;田俊策;魯艷輝;呂仲賢;;不同地理種群稻縱卷葉螟的解毒酶活性及對(duì)藥劑的敏感性[J];浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào);2017年01期

9 劉月慶;樊星;周夏;錢金;楊文慶;楊靜;樊東;;甘藍(lán)夜蛾CYP9A90基因的克隆及溴氰菊酯對(duì)其誘導(dǎo)表達(dá)[J];植物保護(hù);2017年01期

10 齊浩亮;崔麗;王芹芹;劉峰;芮昌輝;;溴蟲(chóng)氟苯雙酰胺對(duì)小菜蛾的毒力及相關(guān)酶活性的影響[J];植物保護(hù);2017年01期

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 曹傳旺;孫麗麗;問(wèn)榮榮;豆曉潔;王志英;;舞毒蛾LdOA1基因克隆分析及對(duì)3種殺蟲(chóng)劑脅迫的響應(yīng)[J];林業(yè)科學(xué);2014年08期

2 范銀君;康志嬌;王志超;史雪巖;高希武;;茉莉酸甲酯處理對(duì)棉鈴蟲(chóng)生長(zhǎng)和解毒能力的影響[J];昆蟲(chóng)學(xué)報(bào);2014年03期

3 周琦;余國(guó)春;蔣岸岸;;眼白化病1型的遺傳基礎(chǔ)研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2013年24期

4 董利霞;譚曉偉;芮昌輝;;甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽亞致死劑量對(duì)不同敏感性棉鈴蟲(chóng)解毒酶活性的影響[J];植物保護(hù);2011年05期

5 張琴;王少麗;楊愿愿;董鈞鋒;;氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)甜菜夜蛾敏感基線的測(cè)定和幼蟲(chóng)體重的影響[J];長(zhǎng)江蔬菜;2010年18期

6 胡珍娣;馮夏;李振宇;張德雍;陳煥瑜;;不同小菜蛾田間種群對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺藥劑的敏感性[J];農(nóng)藥研究與應(yīng)用;2010年03期

7 楊之帆;劉曉黎;張艷艷;;褐飛虱細(xì)胞色素P450單加氧酶基因CYP4CE1的克隆及表達(dá)譜[J];昆蟲(chóng)學(xué)報(bào);2010年03期

8 王建軍;董紅剛;袁林澤;;亞致死濃度茚蟲(chóng)威對(duì)斜紋夜蛾生長(zhǎng)發(fā)育及解毒酶活性的影響[J];揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版);2009年04期

9 侯雅芹;南楠;李鎮(zhèn)宇;;舞毒蛾研究進(jìn)展[J];河北林果研究;2009年04期

10 徐廣春;顧中言;徐德進(jìn);許小龍;石偉山;范鵬;;氯蟲(chóng)苯甲酰胺和噻蟲(chóng)胺對(duì)水稻的表觀安全性評(píng)價(jià)[J];農(nóng)藥;2009年10期

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 謝偉勝;;氯蟲(chóng)苯甲酰胺國(guó)內(nèi)專利發(fā)展動(dòng)態(tài)[J];農(nóng)藥研究與應(yīng)用;2012年06期

2 周小軍;朱國(guó)念;何錦豪;;氯蟲(chóng)苯甲酰胺防治超級(jí)稻二化螟的效果[J];浙江農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年04期

3 ;關(guān)于熱門(mén)品種氟蟲(chóng)雙酰胺與氯蟲(chóng)苯甲酰胺的述評(píng)[J];農(nóng)藥市場(chǎng)信息;2009年16期

4 張發(fā)成;盛仙俏;陳桂華;鄭能文;賈華湊;廖璇剛;;氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)水稻一代二化螟防效及對(duì)稻田蜘蛛的影響[J];中國(guó)稻米;2009年05期

5 秦冬梅;秦旭;徐應(yīng)明;孫揚(yáng);梁學(xué)峰;戴曉華;;土壤和番茄中氯蟲(chóng)苯甲酰胺的殘留檢測(cè)與消解動(dòng)態(tài)研究[J];農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào);2010年05期

6 李翠英;;氯蟲(chóng)苯甲酰胺[J];湖南農(nóng)業(yè);2010年10期

7 吳毅;陳遠(yuǎn)軍;王敏;;氯蟲(chóng)苯甲酰胺的應(yīng)用及推廣前景[J];農(nóng)藥科學(xué)與管理;2010年11期

8 張芳;于淦軍;姜德義;;稻桑混栽區(qū)慎用氯蟲(chóng)苯甲酰胺[J];農(nóng)藥市場(chǎng)信息;2010年21期

9 陳小軍;費(fèi)春;樊麗萍;楊益眾;;氯蟲(chóng)苯甲酰胺在大豆植株中的內(nèi)吸傳導(dǎo)特性[J];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué);2011年11期

10 張懷江;仇貴生;閆文濤;陳漢杰;張平;鄭運(yùn)城;劉池林;;氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)蘋(píng)果樹(shù)主要害蟲(chóng)的控制作用及天敵的影響[J];環(huán)境昆蟲(chóng)學(xué)報(bào);2011年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前4條

1 賀敏;賈春虹;朱曉丹;趙爾成;余平中;陳莉;;超高效液相色譜法測(cè)定玉米中氯蟲(chóng)苯甲酰胺殘留量[A];第七屆全國(guó)儀器分析及樣品預(yù)處理學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2013年

2 段愛(ài)菊;劉順通;張自啟;劉長(zhǎng)營(yíng);;35%氯蟲(chóng)苯甲酰胺WG防治幾種鱗翅目害蟲(chóng)田間藥效[A];華中昆蟲(chóng)研究（第6卷）[C];2010年

3 程勤海;陸志杰;陳國(guó)祥;金周浩;;氯蟲(chóng)苯甲酰胺等4種單劑對(duì)稻縱卷葉螟的田間控制作用探析[A];植物保護(hù)與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全論文集[C];2008年

4 祝中華;寧秀珍;;20%氯蟲(chóng)苯甲酰胺防治二化螟和稻縱卷葉螟試驗(yàn)效果初探[A];植物保護(hù)與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全論文集[C];2008年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前8條

1 本報(bào)記者 譚立云;氯蟲(chóng)苯甲酰胺、氟蟲(chóng)雙酰胺假貨出現(xiàn)[N];江蘇農(nóng)業(yè)科技報(bào);2009年

2 記者施鶯;我市破獲首起假冒化合物專利案[N];南通日?qǐng)?bào);2010年

3 記者施鶯;全國(guó)最大農(nóng)藥產(chǎn)品專利侵權(quán)案在通告破[N];南通日?qǐng)?bào);2010年

4 陳立;氯蟲(chóng)苯甲酰胺主攻稻縱卷葉螟[N];農(nóng)資導(dǎo)報(bào);2010年

5 于丹;氯蟲(chóng)苯甲酰胺治玉米螟安全有效[N];江蘇農(nóng)業(yè)科技報(bào);2008年

6 鼎城區(qū)農(nóng)業(yè)局辦公室 許光;如何防治第一代二化螟[N];常德日?qǐng)?bào);2011年

7 市農(nóng)業(yè)局植保植檢站;水稻7月病蟲(chóng)防治意見(jiàn)[N];常德日?qǐng)?bào);2010年

8 記者 嚴(yán)冬蓮;今年我市中、晚稻病蟲(chóng)中等偏重發(fā)生[N];郴州日?qǐng)?bào);2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 張祥丹;氯蟲(chóng)苯甲酰胺在水環(huán)境中的化學(xué)行為研究[D];廣東工業(yè)大學(xué);2013年

2 劉霞;小菜蛾對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺的抗性機(jī)制及溴氰蟲(chóng)酰胺對(duì)小菜蛾生物學(xué)特性的影響[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

3 郭磊;小菜蛾對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺抗性的分子機(jī)制[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 陳其超;新型氯蟲(chóng)苯甲酰胺衍生物的合成、活性和靶點(diǎn)研究[D];山東大學(xué);2015年

2 黃莉;氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)二化螟亞致死效應(yīng)的研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2015年

3 王�；�;小菜蛾對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺抗性快速形成的生物學(xué)及行為學(xué)機(jī)制[D];杭州師范大學(xué);2016年

4 王孟倫;氯蟲(chóng)苯甲酰胺脅迫下小菜蛾ABCC1-5mRNA的表達(dá)及8種蛻皮激素類似物的活性篩選[D];貴州大學(xué);2016年

5 李清;氯蟲(chóng)苯甲酰胺等藥劑對(duì)雙季水稻主要捕食性天敵影響研究[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

6 鄧放;氯蟲(chóng)苯甲酰胺對(duì)菜青蟲(chóng)田間種群控制效果及作用機(jī)理[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

7 宮維;小菜蛾對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺的抗性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及分子機(jī)理[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

8 譚曉偉;小菜蛾對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺的抗性風(fēng)險(xiǎn)及亞致死效應(yīng)研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2012年

9 劉澤良;氯蟲(chóng)苯甲酰胺低劑量興奮效應(yīng)及其對(duì)擬環(huán)紋豹蛛的影響研究[D];湖北大學(xué);2014年

10 李佳;甜菜夜蛾對(duì)氯蟲(chóng)苯甲酰胺的抗性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及其抗性機(jī)制[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

，

本文編號(hào)：1828421