本文選題：大豆胞囊線蟲 + 鈣調(diào)蛋白�。� 參考：《中國油料作物學(xué)報》2017年01期

【摘要】：為明確受到大豆胞囊線蟲侵染后大豆根部鈣調(diào)蛋白基因的表達(dá)水平,以感病品種遼豆15和抗病品種灰皮支黑豆(ZDD2315)為材料,分別在接種線蟲(SCN3)1d,3d,5d,9d,15d,20d取樣,提取接種和未接種的大豆根部總RNA,利用實(shí)時熒光定量PCR檢測大豆鈣調(diào)蛋白家族:SCaM1、SCaM2、SCaM3、SCaM4和SCaM5基因的表達(dá)量。通過擴(kuò)增SCaM4基因編碼區(qū)序列,構(gòu)建與報告基因GFP融合表達(dá)的細(xì)胞定位檢測載體p COMBIA1303-SCaM4,采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法將其瞬時表達(dá)在本氏煙(Nicotiana benthamiana)葉片上,激光共聚焦顯微鏡觀察。結(jié)果表明無論是抗性品種灰皮支黑豆還是感病品種遼豆15,在線蟲侵染后5個鈣調(diào)蛋白基因的表達(dá)量都在接種后第5d達(dá)最大值,其中灰皮支黑豆SCaM4基因接種后表達(dá)量高達(dá)12.73,是未接種的1.85倍,為感病品種的1.96倍,初步認(rèn)為SCaM4可能參與了灰皮支黑豆抗線蟲的過程。亞細(xì)胞定位的結(jié)果表明SCaM4蛋白定位在細(xì)胞膜上。
[Abstract]:The total RNAs of soybean roots were extracted from inoculated and uninoculated soybean, and the expression of SCAM4 and SCaM5 genes were detected by real-time fluorescence quantitative PCR in the soybean calmodulin family: SCaM1, SCaM2, SCaM3, SCaM4 and SCAM4.By amplifying the coding region of SCaM4 gene, a cell localization detection vector pCOMBIA1303-SCaM4 was constructed, which was fused with the reporter gene GFP. It was transiently expressed on the leaves of Nicotiana benthamiana by Agrobacterium tumefaciens and observed by confocal laser microscope.The results showed that the expression of 5 calmodulin genes reached the maximum at the 5th day after inoculation, whether the resistant variety Liaopizhi black bean or the susceptible cultivar Liaodou 15, was infected with online insect, and the expression of calmodulin gene reached the maximum level on the 5th day after inoculation.After inoculation, the expression of SCaM4 gene in black bean was as high as 12.73, 1.85 times higher than that in non-inoculated black bean, and 1.96 times of susceptible variety. It was suggested that SCaM4 might be involved in the process of resistance to nematode.The results of subcellular localization showed that SCaM4 protein was located on the cell membrane.
【作者單位】： 沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院北方線蟲研究所;
【基金】：國家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目(31330063)
【分類號】：S435.651

【參考文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：1744990