本文選題：CKIP-1　切入點(diǎn)：生長發(fā)育　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文

【摘要】：以骨質(zhì)疏松為代表的骨代謝性疾病影響著全世界范圍內(nèi)越來越多的人群,對(duì)患者的身心健康均產(chǎn)生了巨大的影響。隨著社會(huì)生活方式的改變,骨代謝性疾病患病人群的年齡組成也呈現(xiàn)出年輕化的趨勢(shì)。骨代謝性疾病的特點(diǎn)是骨形成和骨吸收動(dòng)態(tài)平衡的破壞,因此對(duì)骨形成和骨吸收過程的調(diào)控是治療骨代謝性疾病的有效手段。雖然現(xiàn)在已有許多對(duì)于此方面的相關(guān)研究,但針對(duì)不同生長發(fā)育階段骨代謝過程的變化并未有系統(tǒng)的研究。CKIP-1基因是近幾年一個(gè)備受關(guān)注的遺傳因子,它參與了機(jī)體的多項(xiàng)生理過程,其中最吸引我們注意的是其負(fù)調(diào)控骨形成的作用。目前針對(duì)CKIP-1基因在成骨方面的研究集中于其在某個(gè)特定時(shí)間點(diǎn)對(duì)某一種特定類型骨的形成的影響。所以本研究借助CKIP-1基因敲除小鼠模型,通過大體觀察、影像學(xué)、組織學(xué)和血清生化學(xué)檢測(cè)對(duì)不同生長發(fā)育階段的CKIP-1基因敲除小鼠的不同部位骨進(jìn)行評(píng)估。目的:1通過大體水平觀察、影像學(xué)和組織學(xué)評(píng)估CKIP-1基因在不同生長發(fā)育階段對(duì)小鼠整體骨質(zhì)以及對(duì)不同部位骨的骨質(zhì)骨量的影響。2通過血清生化學(xué)評(píng)估CKIP-1基因在不同生長發(fā)育階段對(duì)小鼠整體骨代謝的影響。方法:1選取1、3和6個(gè)月的同窩雄性WT(CKIP-1+/+)和KO(CKIP-1-/-)小鼠進(jìn)行大體觀察,并取材股骨、椎骨和下頜骨,觀察并分析小鼠整體發(fā)育情況和骨質(zhì)生長發(fā)育情況。利用X線、Micro-CT和組織學(xué)染色等方法,測(cè)定1、3和6個(gè)月WT和KO小鼠的股骨、椎骨和下頜骨骨質(zhì)影像學(xué)圖像和骨相關(guān)參數(shù)的差異,并觀察其在組織學(xué)形態(tài)方面的差異。2采集1、3和6個(gè)月WT和KO小鼠的血清,通過酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CKIP-1基因在不同生長發(fā)育階段對(duì)小鼠整體骨形成和骨吸收指標(biāo)的影響。結(jié)果:1大體觀察:WT和KO小鼠的體型在1到3個(gè)月有明顯的增長,而從3個(gè)月到6個(gè)月期間,其體型未見明顯改變,但體重均有上升。在1-6個(gè)月期間,WT和KO小鼠在活動(dòng)和體態(tài)方面均表現(xiàn)正常,未見明顯差異。1月齡的WT和KO小鼠體重?zé)o明顯差異。3月齡和6月齡的KO小鼠體重逐漸大于WT小鼠。KO小鼠下頜骨的骨質(zhì)與WT小鼠下頜骨骨質(zhì)相比,從1個(gè)月開始就顯的略微致密,且這種差異隨著小鼠年齡的增加愈發(fā)明顯。KO小鼠的椎骨和股骨與WT小鼠相比,在1個(gè)月時(shí)未見明顯的差異,但從3個(gè)月開始可觀察到KO小鼠的椎骨和股骨的骨形態(tài)體積和骨密度均大于WT小鼠。2 X線掃描:在1月齡時(shí),WT與KO小鼠的股骨和椎骨影像學(xué)表現(xiàn)無顯著差異,兩組間的下頜骨雖然在形態(tài)上沒有顯著性的差異,但KO小鼠下頜骨的致密性更強(qiáng)。從3個(gè)月開始,KO小鼠三種骨的影像學(xué)表現(xiàn)與WT小鼠有明顯差異,KO小鼠骨阻射性明顯高于WT小鼠,且KO小鼠三種骨的形態(tài)結(jié)構(gòu)均大于WT小鼠。3 Micro-CT掃描:通過三維重建圖像我們發(fā)現(xiàn),1月齡WT和KO小鼠三種骨的骨小梁形態(tài)均沒有明顯的差異,但KO小鼠下頜骨的致密程度略微大于WT小鼠。從3個(gè)月開始,可以明顯的觀察到KO小鼠的骨小梁明顯比WT小鼠致密,且KO小鼠的骨小梁數(shù)量、厚度也明顯大于WT小鼠。1月齡WT和KO小鼠股骨和椎骨無論是骨體積分?jǐn)?shù)(BV/TV)和特定骨表面面積(BS/BV),還是骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁數(shù)量(Tb.N)和骨小梁分離度(Tb.Sp)均未見顯著性差異(P0.05)。KO小鼠下頜骨感興趣域內(nèi)的骨松質(zhì)中,BV/TV、Tb.Th和Tb.N高于WT小鼠(P0.05),而BS/BV和Tb.Sp低于WT小鼠(P0.05)。6月齡KO小鼠股骨、椎骨和下頜骨的BV/TV、Tb.Th和Tb.N高于WT小鼠(P0.05),BS/BV和Tb.Sp低于WT小鼠(P0.05)。4 HE染色:1月齡WT與KO小鼠三種骨微觀結(jié)構(gòu)無明顯差異,但KO小鼠下頜骨的骨小梁較WT小鼠排列略顯緊密。3和6月齡KO小鼠三種骨骨小梁的形態(tài)與WT小鼠仍保持一致,但KO小鼠三種骨內(nèi)骨小梁的數(shù)量和粗度均大于WT小鼠。KO小鼠骨小梁排列也比WT小鼠的有序性更強(qiáng)。5甲苯胺藍(lán)染色:1月齡WT與KO小鼠三種骨的微觀結(jié)構(gòu)無明顯差異。3月齡KO小鼠的三種骨內(nèi)成熟骨小梁數(shù)量明顯增多,骨小梁也更為粗壯,且成骨細(xì)胞數(shù)量也多于WT小鼠,同時(shí)KO小鼠軟骨周的成骨細(xì)胞、類骨組織和新生骨多于WT小鼠。6月齡KO小鼠骨內(nèi)微觀結(jié)構(gòu)更加優(yōu)化,但兩組間成骨細(xì)胞數(shù)量、軟骨周成骨細(xì)胞、類骨質(zhì)和新生骨的差異性小于3月齡小鼠。6酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè):1月齡WT和KO小鼠的各項(xiàng)指標(biāo)均不存在顯著差異。從3月齡開始,KO小鼠的ALP、OCN、COLⅠ、PINP和PICP的值高于WT小鼠(P0.05),但KO和WT小鼠CTX的值仍未體現(xiàn)出顯著性差異。6月齡組結(jié)果與3月齡組基本一致,KO小鼠的骨形成代謝指標(biāo)高于WT小鼠(P0.05),KO與WT小鼠的CTX值仍未見到明顯不同。結(jié)論:1 CKIP-1基因從出生到小鼠死亡的整個(gè)生長發(fā)育過程中并未對(duì)其正常的生理功能造成異常的影響。2影像學(xué)和組織學(xué)結(jié)果顯示,CKIP-1基因在1個(gè)月的發(fā)育早期僅對(duì)下頜骨骨質(zhì)骨量產(chǎn)生了影響,骨質(zhì)結(jié)構(gòu)更加優(yōu)化,骨量增加。在3個(gè)月的體成熟期后,股骨和椎骨也開始體現(xiàn)出差異,隨后持續(xù)到6個(gè)月的老年期。這種骨質(zhì)骨量變化隨著時(shí)間的積累越來越明顯,與小鼠生長發(fā)育周期保持一致性。3血清生化學(xué)結(jié)果顯示,CKIP-1基因?qū)?月齡小鼠骨代謝未產(chǎn)生明顯的影響。CKIP-1基因促進(jìn)了3和6月齡小鼠的骨形成過程,但未影響骨吸收過程。這種調(diào)控作用隨著時(shí)間的積累越來越明顯。
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【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R580

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前3條

1 歐明明;黃曉峰;韓培彥;;牙槽骨發(fā)生的研究進(jìn)展[J];國際口腔醫(yī)學(xué)雜志;2014年02期

2 陳嵩;陳揚(yáng)熙;;顱面骨生長發(fā)育及正畸治療中的3種骨調(diào)控機(jī)制及其概念[J];華西口腔醫(yī)學(xué)雜志;2009年05期

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本文編號(hào)：1729337