甘藍(lán)夜蛾CYP9A90基因的克隆及溴氰菊酯對其誘導(dǎo)表達(dá)
本文選題:甘藍(lán)夜蛾 切入點(diǎn):P 出處:《植物保護(hù)》2017年01期
【摘要】:P450 CYP9A家族基因與昆蟲對擬除蟲菊酯類殺蟲劑的抗性相關(guān)。為證實(shí)溴氰菊酯對甘藍(lán)夜蛾CYP9A基因的誘導(dǎo)效果,本研究采用RT-PCR和RACE技術(shù)克隆獲得甘藍(lán)夜蛾CYP9A基因,real-time PCR檢測該基因在甘藍(lán)夜蛾不同組織中的表達(dá)差異及溴氰菊酯處理甘藍(lán)夜蛾5齡幼蟲不同時間后該基因相對表達(dá)量變化,研究結(jié)果可為甘藍(lán)夜蛾對溴氰菊酯的抗性治理提供依據(jù)。結(jié)果表明:克隆得到甘藍(lán)夜蛾CYP9A基因cDNA全長序列,該序列包含1 828bp,包括1個125bp的5′非編碼區(qū),1個104bp的3′非編碼區(qū)和1個1 599bp的開放閱讀框,編碼532個氨基酸,分子量約為61.1kDa,等電點(diǎn)為8.84,GenBank登錄號為KR676343,被國際P450命名委員會命名為CYP9A90。Real-time PCR分析結(jié)果表明,該基因在甘藍(lán)夜蛾5齡幼蟲6個組織中表達(dá)情況不同,其中在脂肪體中表達(dá)量最高。低劑量溴氰菊酯作用后不同時間點(diǎn)CYP9A90mRNA總體呈現(xiàn)誘導(dǎo)表達(dá)趨勢。
[Abstract]:P450 CYP9A family genes were associated with insect resistance to pyrethroid insecticides. The induction of deltamethrin on CYP9A gene of Spodoptera spp. In this study, RT-PCR and RACE techniques were used to clone the CYP9A gene of Spodoptera spp. The expression of CYP9A gene was detected by real-time PCR in different tissues of Spodoptera spp., and the relative expression level of the gene was changed after deltamethrin was treated with the 5th instar larvae of Spodoptera spp. The results may provide a basis for the management of resistance to deltamethrin. The results showed that the full-length cDNA sequence of CYP9A gene was obtained. The sequence consists of 1 828 BP, including 5 'non-coding region of 125bp, 3' noncoding region of 1 104bp and 1 open reading frame of 1 599bp, encoding 532 amino acids. The molecular weight is about 61.1 kDa, the isoelectric point is 8.84 GenBank accession number is KR676343.The results of CYP9A90.Real-time PCR analysis show that the gene is expressed differently in 6 tissues of 5th instar larvae of Spodoptera exigua. The expression level of CYP9A90mRNA was the highest in fat body, and the tendency of CYP9A90mRNA expression was induced at different time points after the treatment of low dose deltamethrin.
【作者單位】: 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院;東北農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院;
【基金】:黑龍江省教育廳科學(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目(12531045)
【分類號】:S433
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,本文編號:1693825
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