本文選題：林木育種學　切入點：馬尾松　出處：《浙江農(nóng)林大學學報》2017年05期

【摘要】：克隆獲得馬尾松Pinus massoniana PmGPX基因,進行生物信息學分析以及在不同抗蟲材料表達模式分析。在前期馬尾松轉(zhuǎn)錄組測序獲得該基因片段基礎(chǔ)上,用cDNA末端快速擴增(RACE)技術(shù)獲得基因全長,實時熒光定量聚合酶鏈式反應(qRT-PCR)技術(shù)分析該基因在不同抗蟲材料中的表達模式�？寺～@得基因cDNA全長序列,命名為PmGPX。該基因包含741 bp開放閱讀框,編碼246個氨基酸。序列分析表明:該基因具有GPX家族典型的保守結(jié)構(gòu)域,等電點PI 8.29,蛋白分子量27.08 kDa,與針葉植物北美云杉Picea sitchensis的同源性較高,為91%。與單子葉和雙子葉植物同源性較差,大部分在64%~80%,而在GPX家族典型保守結(jié)構(gòu)域的同源性較高,為82%~100%。qRT-PCR技術(shù)分析表明:PmGPX在所有組織中均有表達,在針葉中表達量最高,嫩葉的表達量是根的33.45倍,在根、花和球果中的表達量較低,不同材料日表達模式相似,總體上隨時間出現(xiàn)"升—降—升"模式。該基因在抗蟲材料中啟動較早,且表達量高于對照。推測該基因參與了馬尾松抗蟲防御體系。
[Abstract]:The Pinus massoniana PmGPX gene of Pinus massoniana was cloned and analyzed by bioinformatics and expression patterns of different insect-resistant materials. The full length of the gene was obtained by rapid amplification of the cDNA terminal and the expression pattern of the gene in different insect-resistant materials was analyzed by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (QRT-PCR). The full-length sequence of the gene was cloned and obtained. The gene is named PmGPX. the gene contains 741bp open reading frame and encodes 246 amino acids. Sequence analysis shows that the gene has a typical conserved domain of GPX family. Pi 8.29, protein molecular weight 27.08 kDa. the homology with coniferous Picea sitchensis is 91.The homology with monocotyledonous and dicotyledonous plants is poor, most of them are in the position of 80th, but the homology is higher in the typical conserved domain of GPX family. The results of 82%~100%.qRT-PCR analysis showed that: PmGPX was expressed in all tissues, the highest in needles, 33.45 times in young leaves, lower in roots, flowers and cones, and similar in daily expression patterns of different materials. As a whole, the "up-down-ascending" pattern appeared over time, and the gene started earlier in the insect-resistant materials, and its expression level was higher than that of the control. It was speculated that the gene was involved in the anti-insect defense system of Pinus massoniana (Pinus massoniana).
【作者單位】： 廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學研究院國家林業(yè)局馬尾松工程技術(shù)研究中心/廣西馬尾松工程技術(shù)研究中心;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(31660219) 廣西“八桂學者”專項經(jīng)費資助項目(2011A015) 廣西自然科學基金資助項目(2014GXNSFBA118104)
【分類號】：S791.248

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