發(fā)布時(shí)間：2018-03-17 12:28

  本文選題：天藍(lán)色鏈霉菌M　切入點(diǎn)：sco　出處：《生物技術(shù)通報(bào)》2017年01期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：旨在研究sco1135基因缺失突變對(duì)天藍(lán)色鏈霉菌M145菌株形態(tài)及次級(jí)代謝的影響。通過PCR-targeting方法獲得重組質(zhì)粒p SJ1135,通過接合轉(zhuǎn)移將其導(dǎo)入天藍(lán)色鏈霉菌M145,獲得sco1135基因缺失突變菌株△sco1135,并以p MS82為載體構(gòu)建回補(bǔ)菌株△sco1135com,同時(shí)以p MS82為空載對(duì)照;隨后對(duì)野生型菌株、突變菌株和回補(bǔ)菌株進(jìn)行表型分析和抗生素定量觀察。結(jié)果顯示,表型分析及抗生素定量測定發(fā)現(xiàn),在YBP培養(yǎng)基上△sco1135產(chǎn)孢明顯延遲于野生型M145,放線紫紅素(ACT)產(chǎn)量明顯增加,突變株培養(yǎng)基中ACT產(chǎn)量是野生菌株培養(yǎng)基中的2-3倍;轉(zhuǎn)錄分析結(jié)果表明,48 h時(shí)突變株部分與產(chǎn)孢相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄水平較野生型降低了50%-75%,72 h時(shí)突變株部分與產(chǎn)ACT相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄水平較野生型提高13-20倍。sco1135基因參與調(diào)控M145的孢子形成及次級(jí)代謝產(chǎn)物ACT的產(chǎn)生。
[Abstract]:The aim of this study was to study the effect of sco1135 gene deletion mutation on morphology and secondary metabolism of Streptomyces cereus strain M145. Recombinant plasmid pSJ1135 was obtained by PCR-targeting method, and then introduced into Streptomyces cereus M145 by conjugation transfer, and sco1135 gene deletion was obtained. The mutant strain sco1135 was constructed by using p MS82 as vector and p MS82 as no-load control. Then phenotypic analysis, phenotypic analysis and antibiotic quantitative observation of wild-type, mutant and compensatory strains were carried out, the results showed that phenotypic analysis and antibiotic quantitative analysis showed that, The sporulation of sco1135 on YBP medium was significantly delayed than that of wild type M145, and the yield of actinomycin (actinomycin) was obviously increased, and the yield of ACT in mutant medium was 2-3 times higher than that in wild strain medium. The results of transcriptional analysis showed that the transcriptional level of some of the genes associated with spore production of mutant strain at 48 h was lower than that of wild type, and the transcription level of part of mutant and ACT related gene was 13-20 times higher than that of wild type at 72h after -75h. Spore formation of M145 and production of secondary metabolite ACT.
【作者單位】： 濟(jì)南大學(xué)山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院;山東省醫(yī)藥生物技術(shù)研究中心;山東大學(xué)微生物技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;

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