本文選題：參環(huán)毛蚓　切入點：重金屬富集　出處：《中草藥》2016年16期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的揭示參環(huán)毛蚓MT-2基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機制,為今后采用基因工程技術(shù)改良參環(huán)毛蚓重金屬富集性狀奠定基礎(chǔ)。方法根據(jù)已知的MT-2c DNA序列,設(shè)計特異引物,通過PCR擴增參環(huán)毛蚓MT-2基因的編碼區(qū)基因組序列,擴增產(chǎn)物經(jīng)測序后自行比對分析。基于該序列設(shè)計3條特異引物,采用基因步移技術(shù)克隆其上游的啟動子序列,同時運用Promoter Prediction在線軟件分析預(yù)測其順式元件。結(jié)果經(jīng)PCR擴增、測序后獲得2 826 bp MT-2基因編碼區(qū)序列,將該序列與已知MT-2 c DNA序列(登錄號為KC787373.1)進行比對,發(fā)現(xiàn)MT-2編碼區(qū)由4個外顯子和4個內(nèi)含子組成�；虿揭萍夹g(shù)克隆得到1 534 bp的啟動子序列,經(jīng)Promoter Prediction在線軟件分析,結(jié)果顯示該序列不僅含有TATA-box、CAAT-box等核心啟動子軟件,還具有3個特異響應(yīng)重金屬參與調(diào)控MT-2表達的MRE元件。結(jié)論參環(huán)毛蚓的MT-2基因能被重金屬誘導(dǎo)表達,MT-2基因轉(zhuǎn)錄水平的金屬調(diào)控是通過MT-2基因啟動子區(qū)的金屬調(diào)控元件MRE來實現(xiàn)的。
[Abstract]:Objective to elucidate the transcriptional regulation mechanism of MT-2 gene and lay a foundation for the improvement of heavy metal enrichment by genetic engineering. Methods based on the known MT-2c DNA sequence, specific primers were designed. The coding region of MT-2 gene was amplified by PCR, and the amplified product was sequenced and analyzed. Based on the sequence, three specific primers were designed, and the upstream promoter sequence was cloned by gene step technique. At the same time, the cis element was predicted by Promoter Prediction online software. Results after PCR amplification, the sequence of 2826 BP MT-2 gene coding region was obtained, and the sequence was compared with the known MT-2 c DNA sequence (accession number KC787373.1). It was found that the coding region of MT-2 was composed of 4 exons and 4 introns. The promoter sequence of 1 534 BP was cloned by gene step technique and analyzed by Promoter Prediction online software. The results showed that the sequence contained not only the core promoter software such as TATA-box CAAT-box, but also the core promoter software such as TATA-box. There are also three MRE elements that specifically respond to heavy metals to regulate the expression of MT-2. Conclusion the metal regulation of the transcription level of the MT-2 gene can be induced by heavy metal in the promoter region of the MT-2 gene through the metal regulation of the promoter region of the MT-2 gene. Component MRE to achieve.
【作者單位】： 廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院;湖北中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(30772741) 廣東省科技計劃項目(2009B060700006) 廣州市科技計劃項目(2010Y1-C981)
【分類號】：S865.4;Q78

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本文編號：1571323