番茄GRAS轉(zhuǎn)錄因子家族基因SIGLD1的克隆及VIGS載體構(gòu)建
本文關(guān)鍵詞:番茄GRAS轉(zhuǎn)錄因子家族基因SIGLD1的克隆及VIGS載體構(gòu)建 出處:《基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)》2016年08期 論文類型:期刊論文
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【摘要】:本研究以醋栗番茄(LA2184)為材料,運用生物信息學(xué)方法和PCR技術(shù),預(yù)測SIGLD1基因與番茄抗冷的相關(guān)性,設(shè)計SIGLD1基因的特異性引物,克隆出片段長度為413 bp的序列。以番茄八氫番茄紅素脫氫酶(phytoenedesaturase,PDS)基因作為陽性對照,該基因克隆片段長度為427 bp。系統(tǒng)進化樹顯示,SIGLD1基因與擬南芥中已發(fā)表過的抗冷基因聚類在一起,利用RT-PCR技術(shù),檢測SIGLD1基因在不同冷處理時間點上的表達量,發(fā)現(xiàn)SIGLD1基因在3~6 h的表達量最高,說明該基因在番茄的抗冷過程中發(fā)揮重要作用。本研究成功構(gòu)建出SIGLD1、PDS基因的病毒誘導(dǎo)基因沉默的重組載體。構(gòu)建的p TRV2-SIGLD1、p TRV2-PDS重組載體將為下一步研究番茄中SIGLD1基因的功能驗證奠定實驗基礎(chǔ)。
[Abstract]:In this study, currant tomato (LA2184) as material, using bioinformatics methods and PCR technique, the correlation of SIGLD1 gene and prediction of tomato resistance to cold, the specific primers of SIGLD1 gene, cloned fragment length 413 BP sequence. In eight tomato phytoene dehydrogenase (phytoenedesaturase, PDS) gene as a positive the control, clone the gene length of 427 bp. phylogenetic tree showed that the SIGLD1 gene in Arabidopsis have been published in cold resistance gene cluster together, using RT-PCR technology, the detection of SIGLD1 gene in different time of the cold treatment on the expression of SIGLD1 gene was found in the highest, the expression of 3~6 h, indicating that the gene plays an important role in the process of cold resistance of tomato. This study successfully constructed SIGLD1 and PDS gene of virus induced gene silencing. The recombinant vector construction of P TRV2-SIGLD1, P TRV2-PDS recombinant vector will be the next step The experimental basis for the study of the functional verification of SIGLD1 gene in tomato was established.
【作者單位】: 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院;
【基金】:現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項資金黑龍江省大宗蔬菜新品種選育“黑龍江省大宗蔬菜新品種選育”(GA15B103-1)項目資助
【分類號】:Q943.2
【正文快照】: Cloning and VIGS Vector Construction of GRAS Transcription FactorsFamily Gene SIGLD1 from TomatoNiu Yiling Jiang Xiuming Xu Xiangyang*College of Horticulture,Northeast Agricultural University,Harbin,150030*Corresponding author,xxy709@126.comGRAS轉(zhuǎn)錄因子
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本文編號:1390745
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