擬南芥CYCD3;1基因植物表達載體的構(gòu)建及在煙草中的遺傳轉(zhuǎn)化分析
本文關(guān)鍵詞:擬南芥CYCD3;1基因植物表達載體的構(gòu)建及在煙草中的遺傳轉(zhuǎn)化分析 出處:《安徽農(nóng)業(yè)大學學報》2016年06期 論文類型:期刊論文
更多相關(guān)文章: At CYCD 周期蛋白 遺傳轉(zhuǎn)化 煙草
【摘要】:為了分析植物D型細胞周期蛋白在細胞周期中的作用,采用PCR方法從擬南芥花序中克隆出At CYCD3;1基因的全長c DNA序列。該基因的開放讀碼框為1131 bp,預測編碼376個氨基酸,蛋白質(zhì)的分子量為42701.6 Da,蛋白質(zhì)的等電點為4.89。構(gòu)建植物表達載體p ROKII-At CYCD3;1,并利用農(nóng)桿菌介導的葉盤法將外源基因?qū)胍吧蜔煵葜小Mㄟ^PCR及q RT-PCR檢測顯示,At CYCD3;1成功插入煙草基因組并在轉(zhuǎn)錄水平表達。表型觀察顯示轉(zhuǎn)基因株系與野生型株系相比主要表現(xiàn)為花冠寬度變大,花瓣和萼片長度變長,果實變大,莖干彎曲,葉片卷曲,根尖細胞變小。綜上,擬南芥At CYCD3;1基因的過量表達影響了植物的生長發(fā)育。
【作者單位】: 東北林業(yè)大學林木遺傳育種國家重點實驗室;東北林業(yè)大學生命科學學院;
【基金】:教育部新世紀優(yōu)秀人才支持計劃項目(NO.NCET-12-0808) 國家自然科學基金(31370661)共同資助
【分類號】:Q943.2
【正文快照】: 植物的發(fā)育伴隨著細胞分裂,而細胞周期活動則能調(diào)控細胞分裂[1]。在植物中,CYCD的表達水平和活動受激素與碳水化合物濃度的影響,這對植物細胞分裂過程具有重要的影響。CYCD屬于G1-S期的周期蛋白基因,它的表達主要在細胞周期的G1期與G1/S的轉(zhuǎn)折點[2]。Cyclins作為蛋白激酶的一
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