本文關鍵詞：中間錦雞兒CiPP2C37-like基因的克隆與功能分析

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【摘要】：植物在生長發(fā)育過程中,經常遭遇如干旱、高鹽和低溫等脅迫的影響,使植物生長發(fā)育受到抑制,嚴重時會導致植物死亡。植物必須通過調整自身的代謝功能來適應逆境。蛋白質磷酸化與去磷酸化是細胞生命過程的重要反應類型,也是蛋白質翻譯后的主要修飾方式,生物通過這一系統(tǒng)調控其生命活動。PP2C是重要的蛋白磷酸酶,主要功能是通過參與不同的信號途徑響應逆境脅迫。中間錦雞兒(Caragana intermedia)在抗旱、耐寒、改善土壤養(yǎng)分、保護和恢復生態(tài)平衡等方面有著重要的作用。本研究從實驗室前期構建好的檸條錦雞兒SSH文庫中獲得一個PP2C37-lke基因的中間片段,通過同源克隆獲得了中間錦雞兒CiPP2C37-like基因,并進行了生物信息學、基因表達及相關功能的分析,主要結果如下：1.利用RACE技術擴增中間錦雞兒CiPP2C37-like基因的5'和3'端序列,擴增長度分別為1158bp和505bp。該基因的cDNA全長為1734bp,5'UTR和3'UTR長分別為170bp和334bp,開放閱讀框長為1230bp,編碼含有409個氨基酸的親水性蛋白。2.利用實時熒光定量PCR技術分析CiPP2C37-like基因的表達量。在100μMABA、300mMNaCl、脫水和4℃低溫處理下該基因的表達量上調,說明CiPP2C37-like基因不同程度地受4種脅迫處理誘導。3.在10%、15%PEG6000、200mM NaCl和3μM ABA脅迫處理下檢測CiPP2C37-like基因過表達轉基因擬南芥的萌發(fā)率。結果顯示CiPP2C37-like基因過表達擬南芥種子萌發(fā)率明顯高于野生型。4.在200mM NaCl和干旱脅迫處理下CiPP2C37-like基因過表達轉基因擬南芥幼苗對鹽和干旱的耐受能力增強。5.正常生長條件下,CiPP2C37-like基因過表達轉基因擬南芥在1.3周齡時幼苗比野生型小,4周齡之后與野生型大小基本一致。
【學位授予單位】：內蒙古農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：Q943.2

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