本文關(guān)鍵詞：DOTAP脂質(zhì)體介導(dǎo)VEGF基因轉(zhuǎn)染人脂肪干細(xì)胞及目的基因的表達(dá)

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【摘要】：目的:研究脂質(zhì)體介導(dǎo)的血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)基因轉(zhuǎn)染人脂肪干細(xì)胞(hASCs)及VEGF的表達(dá)。方法:膠原酶消化吸脂術(shù)脂肪,收獲細(xì)胞沉淀,培養(yǎng)至第4代時利用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表型,并誘導(dǎo)其成脂成骨分化,鑒定為hASCs。轉(zhuǎn)染組利用DOTAP脂質(zhì)體將pIRES2-EGFP-VEGF質(zhì)粒轉(zhuǎn)入hASCs,對照組為脂質(zhì)體空載。免疫熒光染色檢測hASCs內(nèi)VEGF的表達(dá),ELISA檢測上清液中VEGF濃度的變化。結(jié)果:1ml吸脂術(shù)脂肪可得到(4.38±0.21)×10~5個細(xì)胞,第4代時hASCs高表達(dá)CD90(81.49%),低表達(dá)CD19(6.37%)、CD31(14.91%)、CD34(17.56%)和CD45(15.39%),誘導(dǎo)分化后油紅O和茜素紅染色均呈陽性。分光光度計顯示質(zhì)粒DNA濃度為595ng/μl。轉(zhuǎn)染組hASCs表達(dá)GFP和VEGF,轉(zhuǎn)染效率為(43.69±18.53)%;對照組不表達(dá)GFP,但表達(dá)較低的VEGF。轉(zhuǎn)染組VEGF的光密度是對照組的2.13倍,其上清液中的VEGF濃度隨時間顯著上升,與對照組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:DOTAP脂質(zhì)體可成功將pIRES2-EGFP-VEGF質(zhì)粒轉(zhuǎn)入hASCs,轉(zhuǎn)染后的VEGF表達(dá)和分泌水平顯著提高。
【作者單位】： 美國德克薩斯大學(xué)MD安德森腫瘤中心整形外科;解放軍總醫(yī)院整形修復(fù)科;美國貝勒醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)系腎臟學(xué)部;北京美萊美容整形醫(yī)院口腔美容中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(No:81272123,No:81571864)
【分類號】：R622
【正文快照】： 脂肪移植是近年來整形美容專業(yè)的熱點(diǎn),脂肪組織分布廣泛,通過吸脂術(shù)獲取簡便,損傷小,患者接受度高。解放軍總醫(yī)院整形修復(fù)科利用脂肪移植進(jìn)行除皺、隆胸、豐臀等美容充填,或修復(fù)難愈創(chuàng)面,重建腫瘤或外傷導(dǎo)致的各種軟組織缺損等。但是脂肪移植早期血管化程度低,大量移植常因缺

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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2 陳猶白;陳聰慧;Qixu Zhang;韓巖;;脂肪干細(xì)胞成骨分化的研究進(jìn)展[J];中華損傷與修復(fù)雜志(電子版);2016年02期

【二級參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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【相似文獻(xiàn)】

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2 李R，

本文編號：1249602