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華癸中慢生根瘤菌7653R 3個(gè)脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的克

發(fā)布時(shí)間:2017-11-26 12:31

  本文關(guān)鍵詞:華癸中慢生根瘤菌7653R 3個(gè)脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的克隆、突變及共生表型


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【摘要】:【目的】脂類轉(zhuǎn)移家族蛋白基因編碼一類參與脂類轉(zhuǎn)運(yùn)及代謝的蛋白。本研究旨在構(gòu)建華癸中慢生根瘤菌3個(gè)脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)家族蛋白基因的突變株,檢測(cè)及分析突變體與紫云英共生條件下的表型及功能。【方法】利用生物信息學(xué)分析與預(yù)測(cè)轉(zhuǎn)脂蛋白的結(jié)構(gòu)特征及功能,采用熒光定量技術(shù)檢測(cè)目標(biāo)基因在自生和共生條件下的表達(dá)特性,通過插入突變技術(shù)構(gòu)建目標(biāo)基因突變株,并進(jìn)行植物盆栽實(shí)驗(yàn)考察其共生表型。【結(jié)果】MCHK-5577、MCHK-2172和MCHK-2779基因編碼蛋白屬于START/RHO alpha_C/PITP/Bet_v1/Cox G/Cal C(SRPBCC)超家族,包含脂類轉(zhuǎn)移結(jié)構(gòu)域,參與脂類轉(zhuǎn)運(yùn)或代謝,與百脈根等中慢生根瘤菌相應(yīng)基因的序列相似性達(dá)95%以上。這3個(gè)基因在共生條件下的表達(dá)水平都增高。分別構(gòu)建了MCHK-5577、MCHK-2172和MCHK-2779基因突變菌株,與野生型菌株7653R相比,接種突變株MCHK-2172mut、MCHK-2779mut和MCHK-5577mut后的植株地上部分生物量和根瘤固氮酶活性顯著降低!窘Y(jié)論】華癸中慢生根瘤菌脂質(zhì)轉(zhuǎn)移家族蛋白基因在共生互作過程中發(fā)揮重要作用,突變后明顯影響共生固氮表型。本文的實(shí)驗(yàn)結(jié)果為深入研究脂類轉(zhuǎn)移蛋白在共生固氮作用中的功能機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(31371549)~~
【分類號(hào)】:Q939.114
【正文快照】: 豆科植物能夠與根瘤菌互作形成根瘤,將空氣中的氮?dú)膺原成銨,以響應(yīng)土壤中的低氮環(huán)境[1]。該過程包括侵染線形成、根瘤菌從侵染線中以內(nèi)吞方式釋放進(jìn)入植物細(xì)胞、分化形成類菌體,其外包裹植物來源的一層膜結(jié)構(gòu)。這層膜稱為類菌體周膜,也稱為共生體膜。類菌體及其外包裹的共生,

本文編號(hào):1229819

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