本文關(guān)鍵詞：太子參3個(gè)肌動(dòng)蛋白基因片段的克隆與序列分析

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【摘要】：目的克隆太子參肌動(dòng)蛋白(Actin)基因片段并進(jìn)行序列分析。方法利用植物Actin基因的保守序列設(shè)計(jì)簡(jiǎn)并引物,通過(guò)RT-PCR和抑制PCR擴(kuò)增太子參Actin基因核心片段。利用半定量RT-PCR分析太子參Actin基因在不同種源、不同器官、不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期的表達(dá)情況。結(jié)果通過(guò)RT-PCR獲得3條太子參Actin基因的核心片段,長(zhǎng)度均為760 bp,依次命名為PhACT1、PhACT2、PhACT3。通過(guò)抑制PCR及序列拼接后3條核心片段依次延長(zhǎng)至1 008、1 008、975 bp,分別編碼336、336、325個(gè)氨基酸殘基。半定量RT-PCR分析表明PhACT2和PhACT3基因在不同種源、不同器官、不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期的表達(dá)量基本恒定,PhACT1基因存在一定的差異。結(jié)論首次從太子參中克隆得到3條太子參Actin基因序列,并確定PhACT2基因適合作為太子參功能基因表達(dá)分析的內(nèi)參基因。
【作者單位】： 貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81460579) 貴州省普通高等學(xué)校特色重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)項(xiàng)目(黔教合KY字[2013]108號(hào)) 施秉中藥材產(chǎn)業(yè)科技合作專(zhuān)項(xiàng)計(jì)劃項(xiàng)目[施中藥科合專(zhuān)項(xiàng)(2014)第6號(hào)] 貴州省研究生工作站建設(shè)項(xiàng)目(黔教研合JYSZ字[2014]016)
【分類(lèi)號(hào)】：S567.53;Q943.2
【正文快照】： 基因表達(dá)分析是了解植物功能基因的表達(dá)規(guī)律,解析植物復(fù)雜代謝網(wǎng)絡(luò)并對(duì)其進(jìn)行表達(dá)調(diào)控的重要手段之一[1]。通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR獲得目的基因的相對(duì)表達(dá)量是目前最為常用的基因表達(dá)檢測(cè)方法。因此,從植物中篩選出在不同器官、不同發(fā)育時(shí)期表達(dá)基本恒定的管家基因作為研究的內(nèi)參

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1225461