本文關(guān)鍵詞：昆蟲(chóng)細(xì)胞表達(dá)基因ⅦNDVHN基因的免疫效力研究

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【摘要】：利用桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)對(duì)ⅦNDV HN基因進(jìn)行表達(dá)研究。RT-PCR擴(kuò)增HN基因,將其克隆到p Fast Bac HT A載體中,陽(yáng)性重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化DH10Bac感受態(tài)細(xì)胞,PCR鑒定獲得陽(yáng)性克隆,堿裂解法提取陽(yáng)性質(zhì)粒,轉(zhuǎn)染Sf9昆蟲(chóng)細(xì)胞,獲得含HN基因的重組桿狀病毒質(zhì)粒,重組病毒感染Sf9細(xì)胞72 h后,進(jìn)行SDS-PAGE電泳、間接免疫熒光和Western-blot試驗(yàn)。免疫SPF雞,間接ELISA測(cè)定抗體滴度,攻毒保護(hù)試驗(yàn)檢測(cè)重組HN蛋白保護(hù)性。結(jié)果顯示,目的蛋白HN在昆蟲(chóng)細(xì)胞中有特異性表達(dá),該蛋白誘導(dǎo)了高滴度的NDV特異性抗體,具有良好的免疫原性;強(qiáng)毒攻擊保護(hù)率達(dá)到75%,與La sota疫苗組保護(hù)率接近,均明顯高于陰性對(duì)照組。上述結(jié)果為NDV新型亞單位疫苗奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 徐州生物工程職業(yè)技術(shù)學(xué)院動(dòng)物工程系;山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;
【基金】：徐州市科技項(xiàng)目(XM13B120) 山東省家禽產(chǎn)業(yè)體系崗位專家項(xiàng)目(SDAIT-13-011-04)共同資助
【分類號(hào)】：S852.65
【正文快照】： 新城疫是由新城疫病毒(Newcastle disease vi-rus,NDV)引起雞/鴿或其他禽類的一種高度接觸性傳染病,是危害我國(guó)養(yǎng)禽業(yè)生產(chǎn)的最嚴(yán)重疾病之一[1-2]。隨著預(yù)防接種的普及,典型ND的毀滅性大流行已基本被控制,但世界各地仍不斷有ND的暴發(fā)或小規(guī)模流行,嚴(yán)重危弱毒疫苗最為常用,但由

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張寰;張永安;秦啟聯(lián);王玉珠;曲良建;李tD;苗麟;殷珍仙;張愛(ài)君;溫發(fā)園;;昆蟲(chóng)細(xì)胞系的培養(yǎng)和建立技術(shù)[J];昆蟲(chóng)學(xué)報(bào);2007年08期

2 黎路林，，陳曲侯;一種貯存昆蟲(chóng)細(xì)胞系的簡(jiǎn)便方法[J];華中師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1995年04期

3 趙佼,譚文松,俞俊棠;轉(zhuǎn)瓶中不同供氧狀況對(duì)昆蟲(chóng)細(xì)胞生長(zhǎng)和代謝的影響[J];華東理工大學(xué)學(xué)報(bào);1998年03期

4 周亞競(jìng),張志芳,張?jiān)d,何家祿;昆蟲(chóng)細(xì)胞培養(yǎng)研究進(jìn)展[J];蠶業(yè)科學(xué);2000年S1期

5 侯理理,蔣O

本文編號(hào)：1200148