發(fā)布時間：2017-11-15 11:13

  本文關(guān)鍵詞：多年生黑麥草LpGCS基因克隆及其在煙草中的初步功能驗證

  更多相關(guān)文章： 多年生黑麥草 γ-谷氨酰基半胱氨酸合成酶 基因克隆 功能驗證

【摘要】：本研究以多年生黑麥草‘高帽2號’葉片為試材,根據(jù)同源基因的CDS序列設(shè)計簡并引物,采用RT-PCR和RACE技術(shù),克隆了多年生黑麥草γ-谷氨�；腚装彼岷铣擅富騆pGCS。該基因全長為1674bp(GenBank登錄號:KJ551844),具有完整的開放閱讀框(ORF),共1125bp;對其氨基酸序列特性、結(jié)構(gòu)以及與其他8種同源基因氨基酸序列間的同源性進行了研究,預(yù)測該蛋白分子量為42.86kDa,屬于不穩(wěn)定類蛋白質(zhì),其蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)以α-螺旋為主;蛋白質(zhì)氨基酸序列與其他8種同源基因氨基酸序列間同源性都比較高;此外,成功構(gòu)建了該基因的正、反義植物表達載體pCAMBIA-Ubi-LpGCS+和pCAMBIA-Ubi-LpGCS-,并通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法獲得轉(zhuǎn)正、反義基因煙草。對轉(zhuǎn)基因植株和野生型煙草進行鎘離子脅迫試驗,生理生化指標(biāo)測試結(jié)果表明鎘離子脅迫處理10d后,轉(zhuǎn)LpGCS+植株中MDA含量低于野生型,光合色素含量與POD、SOD、CAT活性均高于野生型;而轉(zhuǎn)LpGCS-植株中MDA含量高于野生型,光合色素含量與POD、SOD、CAT活性均低于野生型。綜上所述,LpGCS基因在煙草中的過量表達可以提高植株的耐鎘脅迫能力,為進一步利用該基因轉(zhuǎn)化多年生黑麥草培育抗重金屬植株奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 中國林業(yè)科學(xué)研究院林業(yè)研究所國家林業(yè)局林木培育重點實驗室;
【基金】：國家863項目(2011AA10020902)資助
【分類號】：S543.6;Q943.2
【正文快照】： 在植物抗氧化系統(tǒng)中,谷胱甘肽(glutathione,GSH)是植物應(yīng)對活性氧引起的氧化破壞中最為重要的細胞內(nèi)物質(zhì),其在硫的運輸調(diào)控、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、代謝物質(zhì)的結(jié)合、外源化學(xué)物質(zhì)的解毒[1]和一些植物懸浮培養(yǎng)細胞和葉片中脅迫響應(yīng)基因(例如,PR1,GST,GPX,CHS,PAL,SOD等)的表達中起到了重要

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 崔延棠,尉亞輝,慕東;激光輻照多年生黑麥草種子的生物學(xué)效應(yīng)初探[J];西北大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2002年05期

2 ;[J];;年期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王慧忠;匍匐翦股穎和多年生黑麥草對鎘、鉛脅迫的響應(yīng)及部分基因表達調(diào)控機理研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2006年

，

本文編號：1189527