本文關(guān)鍵詞：芥菜型油菜多室基因Bjln2定位的研究

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【摘要】：油菜是我國(guó)最重要的油料作物,油菜產(chǎn)量的提高對(duì)于保障我國(guó)食用油供給安全具有重要意義,而優(yōu)異種質(zhì)資源的開(kāi)發(fā)和利用,是培育高產(chǎn)品種、提高產(chǎn)量的一條重要途徑。研究表明,油菜角果的心室數(shù)目與產(chǎn)量有關(guān),在相同的遺傳背景下,多室油菜的產(chǎn)量顯著高于二室油菜的產(chǎn)量。青海芥菜型多室油菜是源于青藏高原的地方品種,產(chǎn)生的角果通常具有3-4排種子,具有多室的性狀。前人研究結(jié)果表明,青海芥菜型油菜的多室性狀受2對(duì)隱性基因(Bjln1和Bjln2)控制,其中的一對(duì)基因Bjln1已定位于白菜A7染色體上一段208 kb的同源區(qū)間內(nèi)。在此基礎(chǔ)上,本研究利用青海芥菜型多室油菜與塔油2號(hào)雜交,再與多室油菜回交構(gòu)建的BC1分離群體中的二室單株,與多室油菜連續(xù)回交構(gòu)建了Bjln2位點(diǎn)分離的BC4群體(NIL2)。利用AFLP與BSA相結(jié)合的方法對(duì)多室基因Bjln2進(jìn)行初步定位。同時(shí)探索了芥菜型油菜多室基因Bjln1和Bjln2之間的關(guān)系。獲得的主要研究結(jié)果如下:1.等位性分析:對(duì)NIL1(用于Bjln1基因定位的BC4分離群體)和NIL2中的雜合位點(diǎn)進(jìn)行等位性分析,為多室基因Bjln2定位群體的確定打下了基礎(chǔ)。利用NIL1和NIL2群體中的二室單株進(jìn)行雜交,獲得的F1與多室油菜回交獲得BC1,同時(shí)F1自交獲得F2分離群體。通過(guò)對(duì)F2和BC1群體各株系內(nèi)二室與多室單株分離比調(diào)查后發(fā)現(xiàn),F2群體內(nèi)既有3:1分離比的株系,又有15:1分離比的株系;同時(shí),BC1群體內(nèi)也同時(shí)存在1:1分離比和3:1分離比的株系。這些結(jié)果表明Bjln1基因與Bjln2基因是不等位的,NIL2群體中的二室株和多室株的基因型分別為Bjln1Bjln1Bj Ln2Bjln2,Bjln1Bjln1Bjln2Bjln2。2.標(biāo)記篩選:利用NIL2群體作為多室基因Bjln2的定位群體。通過(guò)AFLP與BSA法,同時(shí)結(jié)合比較基因組學(xué)的研究,共篩選到與多室基因Bjln2緊密連鎖的分子標(biāo)記20個(gè),其中包括17個(gè)AFLP分子標(biāo)記,1個(gè)SSR標(biāo)記1個(gè)IP標(biāo)記和1個(gè)SCAR標(biāo)記。3.圖譜構(gòu)建:利用篩選得到的20個(gè)分子標(biāo)記構(gòu)建多室基因Bjln2所在區(qū)域的遺傳連鎖圖譜。兩側(cè)最近標(biāo)記分別為AF13、N1和AF15、AF16、At90,它們與目標(biāo)基因之間的遺傳距離分別為3.1 c M(AF13、N1)和0.7 c M(AF15、AF16、At90);獲得一個(gè)共分離標(biāo)記A1。4.基因定位:利用17個(gè)AFLP標(biāo)記特異片段克隆測(cè)序后同源比對(duì)的結(jié)果結(jié)合篩選到的其余3個(gè)標(biāo)記信息,我們推測(cè)多室基因Bjln2可能位于芥菜型油菜的B7染色體上。
【關(guān)鍵詞】：芥菜型油菜 多室 基因定位
【學(xué)位授予單位】：青海大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：S565.4
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 第1章 文獻(xiàn)綜述10-19
• 1.1 多室油菜的研究進(jìn)展10-14
• 1.1.1 多室油菜種類(lèi)及表型10-11
• 1.1.2 多室油菜角果的解剖學(xué)研究11
• 1.1.3 油菜多室性狀遺傳規(guī)律的研究11-12
• 1.1.4 油菜多室基因定位的研究12
• 1.1.5 油菜多室基因克隆的研究12-13
• 1.1.6 油菜多室基因遺傳機(jī)理的研究13-14
• 1.1.7 其他植物多室性狀的研究14
• 1.2 分子標(biāo)記的研究與利用14-16
• 1.2.1 常見(jiàn)的幾種分子標(biāo)記及其應(yīng)用14-16
• 1.2.2 分子標(biāo)記輔助選擇16
• 1.3 比較基因組學(xué)在蕓薹屬的研究與利用16-18
• 1.3.1 蕓薹屬比較基因組研究進(jìn)展16-17
• 1.3.2 蕓薹屬與擬南芥比較基因組研究進(jìn)展17-18
• 1.4 本研究的目的和意義18-19
• 第2章 材料與方法19-29
• 2.1 試驗(yàn)材料19-20
• 2.2 試驗(yàn)方法20-29
• 2.2.1 群體構(gòu)建與等位性分析20-23
• 2.2.1.1 群體構(gòu)建20-22
• 2.2.1.2 性狀調(diào)查和統(tǒng)計(jì)22-23
• 2.2.2 芥菜型油菜多室基因Bjln2的定位23-29
• 2.2.2.1 DNA提取及性狀調(diào)查23
• 2.2.2.2 AFLP與BSA分析23-27
• 2.2.2.3 AFLP特異片段的回收、連接、克隆和測(cè)序27-28
• 2.2.2.4 SSR和IP等標(biāo)記的篩選、測(cè)序28
• 2.2.2.5 與擬南芥、白菜型油菜基因組序列共線(xiàn)性分析28
• 2.2.2.6 遺傳連鎖圖譜的構(gòu)建28-29
• 第3章 結(jié)果與分析29-37
• 3.1 回交群體的等位性分析29-30
• 3.2 多室基因Bjln2的初步定位30-36
• 3.2.1 BC4分離群體果室性狀表現(xiàn)30-31
• 3.2.2 標(biāo)記篩選結(jié)果31-33
• 3.2.3 構(gòu)建與Bjln2基因連鎖遺傳圖譜33-35
• 3.2.4 Bjln2基因的初步定位35-36
• 3.3 小結(jié)36-37
• 第4章 討論37-39
• 4.1 芥菜型油菜多室基因等位性分析37
• 4.2 芥菜型油菜多室基因Bjln2的定位37-39
• 參考文獻(xiàn)39-46
• 致謝46-47
• 附錄47-49
• 作者簡(jiǎn)介49

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