發(fā)布時間：2017-10-30 15:03

  本文關(guān)鍵詞：丹參多酚氧化酶基因的克隆及表達分析

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【摘要】：前期研究發(fā)現(xiàn)多酚氧化酶(PPO)能正向調(diào)控丹酚酸B合成,該研究運用RACE技術(shù),從丹參毛狀根中克隆到多酚氧化酶基因(SmPPO,GenBank登錄號為KF712274)全長序列,其cDNA全長1 930bp,開放閱讀框為1 770bp,編碼589個氨基酸。將SmPPO與管狀花目其它4個物種進行氨基酸序列比對,在N端類囊體轉(zhuǎn)移結(jié)構(gòu)域中發(fā)現(xiàn)都存在2個N-豆蔻酰化位點。在丹參毛狀根培養(yǎng)液中加入不同誘導因子,利用實時熒光定量PCR檢測,發(fā)現(xiàn)該基因在酵母提取物處理中表達量顯著上調(diào),但在銀離子、抗壞血酸和L-半胱氨酸處理中表達受到明顯抑制。運用HPLC技術(shù)同步檢測毛狀根中丹酚酸B含量,顯示出與基因表達相同的變化趨勢。研究表明,丹參中多酚氧化酶基因(SmPPO)對丹酚酸B的合成具有正向調(diào)控作用。
【作者單位】： 旱區(qū)作物逆境生物學國家重點實驗室中藥指紋圖譜與天然產(chǎn)物國家地方聯(lián)合工程研究中心西北農(nóng)林科技大學生命科學學院;
【關(guān)鍵詞】： 丹參 多酚氧化酶 基因克隆 序列全長 基因表達
【基金】：國家自然科學基金(81373908) 陜西省自然科學基金(2015JM3092;2016JM8108) 中央高校基本科研業(yè)務費(2452016003)
【分類號】：S567.53
【正文快照】： 多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)是由核基因編碼的含銅金屬酶,廣泛存在于植物、真菌和昆蟲中。它們能氧化多酚類化合物生成不穩(wěn)定的醌類物質(zhì),醌發(fā)生聚合并與氨基酸發(fā)生反應,生成黑色素或褐色素,導致果蔬褐變、營養(yǎng)品質(zhì)和商品性下降。醌類物質(zhì)具有毒性,并通過共價調(diào)節(jié)與氨

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本文編號：1118101