本文關(guān)鍵詞：團(tuán)頭魴白細(xì)胞介素6基因啟動子報(bào)告載體的構(gòu)建及活性分析

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【摘要】：為了解魚類白細(xì)胞介素6(IL-6)基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控原理及其免疫作用機(jī)制,構(gòu)建5個(gè)團(tuán)頭魴il-6基因啟動子的熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒(PGL3-IL-6P),以PGL3-basic質(zhì)粒作為陰性對照,將它們分別與內(nèi)參質(zhì)粒pRL-TK共轉(zhuǎn)染進(jìn)鯉EPC細(xì)胞,并用100ng/mL的LPS誘導(dǎo)轉(zhuǎn)染過重組載體的細(xì)胞,24h后檢測熒光素酶的活性。結(jié)果顯示:與陰性對照組相比,質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組PGL3-IL-6P-0、PGL3-IL-6P-1、PGL3-IL-6P-2、PGL3-IL-6P-3與PGL3-IL-6P-4的熒光素酶活性均明顯升高,其中PGL3-IL-6P-4組的熒光素酶活性最高,表明該啟動子缺失體(-379至+34)包含il-6的核心啟動子。用LPS刺激轉(zhuǎn)染過重組載體的細(xì)胞后發(fā)現(xiàn),與未經(jīng)LPS刺激的對照組相比,僅PGL3-IL-6P-4組的活性明顯增強(qiáng),而其余缺失體的活性則沒有顯著變化,這進(jìn)一步表明PGL3-IL-6P-4缺失體包含核心啟動子區(qū),并推測該核心啟動子區(qū)域存在的潛在轉(zhuǎn)錄因子NF-κB與C/EBPβ等可能是響應(yīng)LPS刺激的重要作用元件。
【作者單位】： 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院/農(nóng)業(yè)部淡水生物繁育重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;淡水水產(chǎn)健康養(yǎng)殖湖北省協(xié)同創(chuàng)新中心;西北農(nóng)林科技大學(xué)動物科技學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 團(tuán)頭魴 白細(xì)胞介素 熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒 啟動子活性 LPS
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31572613) 國家科技支撐計(jì)劃(2012BAD26B00) 中央高校基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)(2014PY042和2662015PY134)
【分類號】：S917.4
【正文快照】： 白細(xì)胞介素6(IL-6)是一種多功能細(xì)胞因子,在調(diào)控動物免疫應(yīng)答反應(yīng)、急性期蛋白的合成和造血功能等方面具有非常重要的作用。許多細(xì)胞,如活化的T/B淋巴細(xì)胞、單核-巨噬細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、肝細(xì)胞、造血干細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等[1-2]都可以產(chǎn)生IL-6。正常狀態(tài)下,動物血漿

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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2 曾聰;張耀;曹小娟;羅偉;劉肖蓮;高澤霞;錢雪橋;王衛(wèi)民;;團(tuán)頭魴3個(gè)地理種群雜交效果的配合力和微衛(wèi)星標(biāo)記預(yù)測[J];水產(chǎn)學(xué)報(bào);2012年06期

3 易少奎;高澤霞;羅偉;段曉克;李艷和;王衛(wèi)民;;團(tuán)頭魴EST-SSR在厚頜魴中的跨種擴(kuò)增及雜交F_1的鑒定[J];水產(chǎn)學(xué)報(bào);2013年07期

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4 陳婷婷;團(tuán)頭魴源嗜水氣單胞菌流行病調(diào)查及致病性、耐藥性研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

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【二級參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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1 林帆;劉清華;李軍;隋娟;肖志忠;徐世宏;馬道遠(yuǎn);肖永雙;;真鯛(Pagrus major)vasa基因5′端啟動子克隆及表達(dá)載體構(gòu)建[J];海洋與湖沼;2011年02期

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中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 田麗芳;集胞藻6803中ndhK基因啟動子結(jié)構(gòu)與功能的初步分析[D];上海師范大學(xué);2013年

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本文編號：1106286