發(fā)布時(shí)間：2017-10-25 03:20

  本文關(guān)鍵詞：德式乳桿菌保加利亞亞種分解代謝控制蛋白CcpA基因敲除突變株的構(gòu)建

  更多相關(guān)文章： 分解代謝控制蛋白 德式乳桿菌保加利亞亞種 基因敲除 突變株

【摘要】：在革蘭氏陽(yáng)性菌中,分解代謝控制蛋白(Ccp A)是一種參與碳代謝和氮代謝的多效調(diào)控蛋白。利用同源重組技術(shù),以德式乳桿菌保加利亞亞種為研究對(duì)象,構(gòu)建Ccp A基因敲除突變株。首先以德式乳桿菌保加利亞亞種ATCC11842基因組DNA和質(zhì)粒p BR322為模板,擴(kuò)增Ccp A基因和四環(huán)素抗性基因(Tet),然后分別將Ccp A基因和Tet基因連接到載體p Back Zero-T Vector上,再對(duì)中間載體p Back Zero-Ccp A和p Back Zero-Tet進(jìn)行雙酶切,回收純化雙酶切后的目的片段并連接獲得Ccp A基因敲除的重組載體p CT。通過(guò)同源重組篩選Ccp A基因敲除突變株,菌落PCR和測(cè)序鑒定結(jié)果均顯示Ccp A基因敲除突變株構(gòu)建成功,這為闡明該調(diào)控蛋白在德式乳桿菌保加利亞亞種代謝過(guò)程中的作用奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院乳品科學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 分解代謝控制蛋白 德式乳桿菌保加利亞亞種 基因敲除 突變株
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31201397) 乳品科學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放課題(2012KLDSOF-06)
【分類號(hào)】：Q78
【正文快照】： 碳分解代謝物阻遏(carbon catabolite repres-sion,CCR)是指微生物在混合碳源發(fā)酵時(shí)優(yōu)先利用速效碳源(通常為葡萄糖),且該碳源的代謝產(chǎn)物抑制其它非速效碳源代謝的相關(guān)基因表達(dá)和蛋白活性,從而影響非速效碳源利用的現(xiàn)象。在低GC含量革蘭氏陽(yáng)性菌中,CCR效應(yīng)的關(guān)鍵調(diào)控因子為分

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 劉德培，方福德，梁植權(quán);基因敲除[J];生理科學(xué)進(jìn)展;1995年01期

2 石東喬;“基因敲除”研究進(jìn)展[J];自然雜志;1996年01期

3 熊鷹;基因敲除與學(xué)習(xí)、記憶:現(xiàn)狀、問(wèn)題和展望[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;1998年06期

4 楊曉;;“基因敲除”敲開諾獎(jiǎng)之門[J];華夏地理;2007年11期

5 呂飛;;淺談“基因敲除”[J];生物學(xué)教學(xué);2010年10期

6 王曉敏;侯占銘;;“基因敲除”技術(shù)的研究與應(yīng)用[J];考試周刊;2013年87期

7 Qian XU;Cong-yi ZHU;Ming-shang WANG;Xue-peng SUN;Hong-ye LI;;一種高效的柑橘綠霉菌基因敲除體系的構(gòu)建(英文)[J];Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology);2014年02期

8 賀松;張德純;;基因敲除方法及其應(yīng)用[J];中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志;2009年02期

9 趙麗華;梁浩;云亭;李榮鳳;;牛肌肉生長(zhǎng)抑制素基因敲除打靶載體的構(gòu)建[J];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué);2012年02期

10 杜慶林;樊祥宇;毛金校;謝建平;;分枝桿菌中基因敲除操作工具研究進(jìn)展[J];遺傳;2012年07期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 賀松;張德純;;基因敲除方法及其應(yīng)用[A];重慶市預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)2009年論文集[C];2009年

2 王景;穆媛媛;黎庶;陳志瑾;熊坤;叢延廣;;革蘭陰性菌基因敲除載體的構(gòu)建及其應(yīng)用[A];重慶微生物學(xué)會(huì)第九屆會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2009年

3 孟凡偉;;利用基因敲除研究小鼠Dapper2基因的功能[A];中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)模式生物與人類健康研討會(huì)會(huì)議論文集[C];2010年

4 黃黎珍;顧為望;;利用體細(xì)胞核移植技術(shù)生產(chǎn)基因敲除豬的研究[A];第九屆中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)年會(huì)（2010新疆）論文集[C];2010年

5 師福山;趙德明;;朊蛋白受體基因敲除的打靶載體構(gòu)建[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)——第二屆中國(guó)獸醫(yī)臨床大會(huì)論文集(上冊(cè))[C];2010年

6 李志杰;丁壯;;基因敲除及其在動(dòng)物疾病上的研究應(yīng)用[A];第六屆全國(guó)會(huì)員代表大學(xué)暨第11次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（上）[C];2005年

7 周晴晴;閆紅霞;金戈;康巧珍;;蛋白4.1R基因敲除對(duì)小鼠T細(xì)胞的影響[A];第九屆中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)年會(huì)（2010新疆）論文集[C];2010年

8 路福平;田琳;;分枝桿菌甾酮C_(1,2)位脫氫酶的基因敲除[A];2006中國(guó)微生物學(xué)會(huì)第九次全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2006年

9 耿松梅;;cre蛋白酶的基因敲除機(jī)制在生物研究中的應(yīng)用[A];2006中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

10 宋浩雷;郭曉賢;黃建忠;;釀酒酵母乙醇脫氫酶基因敲除的研究[A];2006中國(guó)微生物學(xué)會(huì)第九次全國(guó)會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2006年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 李e灞頸ㄊ迪凹?xì)J，

本文編號(hào)：1091842